現(xiàn)貨人乳酸脫氫酶ELISA 檢測(cè)試劑盒的準(zhǔn)備

人乳酸脫氫酶ELISA 檢測(cè)試劑盒用 途：
　　　　人LDH ELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、緩沖液中細(xì)胞上清液及各種體液中的LDH 。本試劑盒可以檢測(cè)天然和重組的LDH 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。
　　　　
試驗(yàn)原理：
　　　　人LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知LDH 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將LDH 和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

     人乳酸脫氫酶ELISA 檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（20×）的稀釋：蒸餾水20倍稀釋。

操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

結(jié)果分析
以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的LDH 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

     人乳酸脫氫酶ELISA 檢測(cè)試劑盒DA2355-0.1ml MCP-1/CCL2 （monocyte chemotactic protein1）mouse, rat 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體（大、小鼠） 0.1ml
DA2355-0.2ml MCP-1/CCL2 （monocyte chemotactic protein1）mouse, rat 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體（大、小鼠） 0.2ml
DA2356-0.2ml MCP-1/CCL2（Monocyte chemotactic protein 1）human 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體（人） 0.2ml
DA2357-0.2ml MCP-2/CCL8（Monocyte chemotactic protein 2）human 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體（人） 0.2ml
DA2358-0.2ml MCP-2/CCL8（Monocyte chemotactic protein 2）rat,mouse 單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體（大、小鼠） 0.2ml
DA2359-0.2ml MCP-3/CCL7（Monocyte chemotactic protein 3）human 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體（人） 0.2ml
DA2360-0.2ml MCP-3/CCL7（Monocyte chemotactic protein 3）（rat,mouse） 單核細(xì)胞趨化蛋白3抗體（大、小鼠） 0.2ml
DA2361-0.2ml CCL9/CCL10/MIP-1 gamma（Macrophage inflammatory protein 1-γ） 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ抗體 0.2ml
DA2362-0.2ml MC-1R （melanocortin-1-receptor） 黑皮質(zhì)素-1受體抗體 0.2ml
DA2363-0.2ml MCT1（monocarboxylate transporter 1） 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 0.2ml
DAR1158-0.1ml Rabbit anti-mouse IgM/APC  熒光素APC標(biāo)記兔抗小鼠IgM 0.1ml
DAR1159-0.1ml Rabbit anti-horse IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記兔抗馬IgG 0.1ml
DA2364-0.2ml MCM2（minichromosome maintenance protein 2） 微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 0.2ml
DA2365-0.2ml MCM3（minichromosome maintenance deficient 3） 微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 0.2ml
DA2366-0.2ml MCM7（minichromosome maintenance protein 7） 微小染色體維持缺陷蛋白7抗體 0.2ml
DA2367-0.1ml M-CSF （Macrophage Colony Stimulating Factors） 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 0.1ml
DA2367-0.2ml M-CSF （Macrophage Colony Stimulating Factors） 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 0.2ml
DA2368-0.2ml Mcl-1（myeloid cell leukemia 1） 髓樣細(xì)胞白血病-1抗體 0.2ml
DA2369-0.1ml MDM2 （urine double minute 2） 雙微體2癌基因抗體 0.1ml
DA2369-0.2ml MDM2 （urine double minute 2） 雙微體2癌基因抗體 0.2ml
DAR1161-0.1ml Streptavidin/APC 熒光素APC標(biāo)記鏈霉親和素 0.1ml
DAR1162-0.1ml rec Protein A/APC 熒光素APC標(biāo)記重組純化蛋白A 0.1ml
DA2370-0.1ml MDR1（multidrug resistance 1） 多藥耐藥蛋白抗體 0.1ml
DA2370-0.2ml MDR1（multidrug resistance 1） 多藥耐藥蛋白抗體 0.2ml
DA2371-0.2ml MEF2（myocyte enhancer-binding factor 2） 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 0.2ml
DA2374-0.2ml Melamine 三聚氰胺抗體 0.2ml
DA2375-0.2ml Melan-A/MART-1 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 0.2ml
DA2377-0.2ml MEK1/MAPKK1/MEKK1（mitogen activated protein kinase kinase 1） MEK1/MAPKK1抗體（N-端） 0.2ml
DA2378-0.2ml Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗體 0.2ml
    人乳酸脫氫酶ELISA 檢測(cè)試劑盒DA2379-0.2ml Metal ion transporter 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.2ml
DA2380-0.2ml Mfn1 （Mitofusin1） 線粒體融合蛋白1抗體 0.2ml
DAR1164-0.1ml Mouse IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記小鼠IgG（細(xì)胞流式同型對(duì)照） 0.1ml
DAR1165-0.1ml Goat IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記羊IgG（細(xì)胞流式同型對(duì)照） 0.1ml
DAR1166-0.1ml Rat IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記大鼠IgG（細(xì)胞流式同型對(duì)照） 0.1ml
DAR1167-0.1ml Bovine IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記牛IgG 0.1ml
DAR1168-0.1ml Bovine IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記牛IgM 0.1ml
DA2381-0.1ml MGMT （O6-methylguanine-DNA methyltransferase） O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.1ml
DA2381-0.2ml MGMT （O6-methylguanine-DNA methyltransferase） O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
DA2382-0.2ml MT（metallothionein） 金屬硫蛋白抗體 0.2ml
DA2383-0.2ml MGr1-Ag/37LRP（P37-kDa laminin receptor precursor）（NT） 層粘連蛋白受體1抗體（N端） 0.2ml
DA2384-0.2ml MTA1（Metastasis-associated 1） 腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
DA2385-0.2ml MGr1-Ag/37LRP（P37-kDa laminin receptor precursor）（CT） 層粘連蛋白受體1抗體（C端） 0.2ml
DA2386-0.2ml Myf6（Myogenic factor 6） 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 0.2ml
DAR1175-0.1ml Guinea IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記豚鼠IgM 0.1ml
DAR1176-0.1ml Horse IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記馬IgG 0.1ml
DAR1177-0.1ml Horse IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記馬IgM 0.1ml
DAR1178-0.1ml human IgG/APC 熒光素APC標(biāo)記人IgG 0.1ml
DAR1179-0.1ml human IgM/APC 熒光素APC標(biāo)記人IgM 0.1ml
DA2387-0.2ml MICA（MHC class I polypeptide-related sequence A） 細(xì)胞應(yīng)激分子抗體 0.2ml
DA2388-0.2ml Microsporidia 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體 0.2ml
DA2389-0.2ml Midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1抗體 0.2ml
DA2390-0.2ml Midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2抗體 0.2ml
DA2391-0.2ml MK（Midkine） 中期因子/肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體 0.2ml
DA2392-0.2ml MLCK（myosin light chain kinase） 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 0.2ml
DA2393-0.1ml MIF （Macrophage Migration Inhibitory Factor） 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體 0.1ml
DA2393-0.2ml MIF （Macrophage Migration Inhibitory Factor） 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體 0.2ml
DA2394-0.1ml MIP-1α （macrophage inflammatory protein 1α） 巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體 0.1ml
DA2394-0.2ml MIP-1α （macrophage inflammatory protein 1α） 巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體 0.2ml
DA2421-0.2ml Mouse IgA 抗小鼠IgA抗體 0.2ml
DA2431-0.2ml α-MSH/POMC（alpha-melanocyte stimulating hormone） α黑素細(xì)胞刺激素/阿黑皮素原抗體 0.2ml
DA2395-0.1ml MIP-1β （macrophage inflammatory protein 1β） 巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 0.1ml
DA2395-0.2ml MIP-1β （macrophage inflammatory protein 1β） 巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 0.2ml
DA2396-0.1ml MIP2 （myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2） 巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2抗體 0.1ml