60218ES Blasticidin S 殺稻瘟菌素S(滅瘟素)
- 公司名稱(chēng) 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào) 60218ES
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/12/12 8:38:26
- 訪問(wèn)次數(shù) 1505
聯(lián)系方式:曹女士400-6111-883 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
---|
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Blasticidin S (10 mg/mL in Solution) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素) | 60218ES10 | 10 mg | 435.00 |
Blasticidin S (10 mg/mL in Solution) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素) | 60218ES50 | 5×10 mg | 2185.00 |
Blasticidin S (10 mg/mL in Solution) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素) | 60218ES60 | 10×10 mg | 4200.00 |
Blasticidin S 殺稻瘟菌素S (滅瘟素) | 60218ES80 | 1 g | 21368.00 |
作用機(jī)理
Blasticidin S是一種來(lái)自Streptomyces griseochromogenes的核苷類(lèi)抗生素,通過(guò)干擾核糖體中肽鍵的形成來(lái)特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsr或BSD耐受基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素具有快速而強(qiáng)效的作用模式,很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。
Cat#60218ES10、60218ES50、60218ES60均以液體形式提供,濃度為10 mg/mL(in HEPES緩沖液,pH 7.5)。
Cat#60218ES80為粉末形式提供,使用時(shí)可用無(wú)菌水或者緩沖液配制成5-10 mg/mL的儲(chǔ)存液。
抗性基因
目前已經(jīng)克隆和測(cè)序的殺稻瘟菌素耐受基因有3種,一種是分離自產(chǎn)生菌Streptoverticillum sp.的乙?;D(zhuǎn)移酶基因bls,另外兩種是脫氨酶基因,包括從Bacillus cereus 中分離的bsr和從Aspergillus terreus 中分離的BSD 基因。Bsr和 BSD 基因是///常用的篩選標(biāo)志,用于哺乳動(dòng)物和植物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),也可用于E.Coli。
產(chǎn)品性質(zhì)
CAS號(hào)(CAS NO.) | 3513-03-9 |
分子式(Molecular Fomular) | C17H26N8O5·HCl |
分子量(Molecular Weight) | 458.9 g/mol |
純度(Purity) | >95%(HPLC) |
結(jié)構(gòu)(Structure) |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存。粉末有效期3年,液體有效期1年,避免反復(fù)凍融。
應(yīng)用濃度
1)Escherichia coli
E. coli對(duì)Blasticidin S的敏感性稍差,但是轉(zhuǎn)化子對(duì)Blasticidin S具有耐受性,可以用低鹽LB培養(yǎng)基(pH 8)進(jìn)行篩選,濃度范圍為50-100 μg/mL Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。
2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞
哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/mL。初次實(shí)驗(yàn)建議通過(guò)滅殺曲線來(lái)確定///佳使用濃度。
一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞的建議工作濃度:
細(xì)胞 | 種屬 | 組織 | 培養(yǎng)基 | Blasticidin S濃度 (μg/mL) |
HeLa | Human | Uterus | DMEM | 3-10 |
293 | Human | Kidney | DMEM | 3-10 |
B16 | Mouse | Melanoma | RPMI | 3-10 |
PC1.0 | Hamster | Adenocarcinoma | RPMI | 10-30 |
操作步驟(哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選)
Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/mL。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,在含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中孵育,用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
1)轉(zhuǎn)染后48h,用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代(注:細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作///好。細(xì)胞密度太高,抗生素效率降低。細(xì)胞分盤(pán)時(shí)覆蓋率///好不超過(guò)25%)。
2)每3-4天去除培養(yǎng)基,加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基。
3)7天后檢測(cè)細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類(lèi)和轉(zhuǎn)染/篩選效率,集落形成可能需要增加一周或更久。
4)轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35 mm細(xì)胞盤(pán)中,加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。