實(shí)時(shí)熒光定量pcr實(shí)驗(yàn)服務(wù)
- 公司名稱 上海達(dá)為科生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2022/12/23 13:01:49
- 訪問次數(shù) 1437
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| 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction,PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法，而且也是一個(gè)能對核酸分子進(jìn)行定量的有力工具。1996年，美國Applied Biosystems公司推出了一種新定量試驗(yàn)技術(shù)間實(shí)時(shí)熒光定量PCR它是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤；實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對產(chǎn)物進(jìn)行分析，計(jì)算待測樣品模板的初始濃度。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)內(nèi)容：
PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；剛開始時(shí)，探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5'端一3'端外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR樣品準(zhǔn)備條件:
細(xì)胞樣品：收集細(xì)胞后放入液氮中速凍保存或速東24h后轉(zhuǎn)入-80°C冰箱保存；收集細(xì)胞后，視細(xì)胞量，直接加入1-1.5mL Trizol溶解裂解細(xì)胞，再轉(zhuǎn)入-80°C冰箱保存。
組織樣品：動(dòng)物組織一般取材后立即放入液氮中速凍保存，液氮凍存24h后可轉(zhuǎn)入-80°C冰箱保存；組織樣品同樣可以采用Trizol溶解裂解后放入-80°C冰箱保存。特殊組織(植物等)建議采用新鮮組織即刻提取RNA,逆轉(zhuǎn)合成cDNA后-20°C保存?zhèn)溆?。所有樣品的處理和保存過程中，切總反復(fù)凍融。
樣品運(yùn)輸條件：樣品運(yùn)輸條件根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣品的處理?xiàng)l件，可以選擇液氮或者干冰運(yùn)輸。
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