BD6033 多功能氧化酶試劑盒 抗氧
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BD6033
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/3/31 10:05:48
- 訪問次數(shù) 19
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BD6033 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應(yīng) |
多功能氧化酶（(mixed function oxidase，MFO）試劑盒說明書
微量法 100T/96S
多功能氧化酶試劑盒 抗氧
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：
多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶，可產(chǎn)生降解反應(yīng)，可使原化學物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出；還可產(chǎn)生激活反應(yīng)，可使原化學物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì)，導致毒性增強，成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學物質(zhì)相互作用的深入研究，對于從分子生物學水平上進一步了解外源性化學物質(zhì)的毒作用具有重要意義。
測定原理：
MFO 催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基ben酚，在 400nm 下有特征吸光值。
組成：
產(chǎn)品名稱 | BD6033-100T/96S | Storage |
提取液：液體 | 120ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 24ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 3 管 | 4℃ |
試劑三：液體 | 24ml | 4℃ |
試劑四：液體 | 64ml | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
試劑二：粉劑×3 管，-20℃保存；臨用前取一管加入 1.5ml 水溶解，現(xiàn)配現(xiàn)用。
自備儀器和用品：
酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、96 孔板、研缽、冰、蒸餾水、氯仿。
粗酶液提取：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液（ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液），進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心 20min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、酶標儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 400nm。
2、在EP 管中依次加入如下試劑
試劑名稱（μl） | 測定 | 空白 | ||||||
試劑一 | 200 | 200 | ||||||
試劑二 | 40 | 40 | ||||||
提取液 | 160 | 360 | ||||||
樣本 | 200 | |||||||
混勻，37℃水浴 30min | ||||||||
試劑三 | 200 | 200 | ||||||
分別加入 1000μl 氯仿，充分混勻萃取，靜置 10min，取下層氯仿層 0.6ml 至新的EP 管中。再加入試劑四 0.6ml，充分混勻萃取，取上層水相 0.2ml 于 96 孔板中，400nm 下測定吸光值A(chǔ) 測定與A 空白，△A=A 測定-A 空白?？瞻坠苤恍铚y一管。
MFO 活性計算:
標準曲線：y = 0.0119x + 0.0021，R2 = 0.9997；y，吸光度；x,標準品濃度，單位nmol/ml。
按樣本質(zhì)量計算
單位定義：每g 樣本每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
MFO（nmol/min/g 鮮重）=（△A-0.0021）÷0.0119×V 總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=8.4×（△A-0.0021）÷W
按樣本蛋白濃度計算
單位定義：每mg 組織蛋白每分鐘產(chǎn)生 1nmol 對硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
MFO（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0021）÷0.0119×V 總÷(V 樣×Cpr)÷T
=8.4×（△A-0.0021）÷Cpr
V 總：最終萃取液體積，0.6 ml；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，200μl；T：反應(yīng)時間，30min；W：樣品質(zhì)量，
g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml。
多功能氧化酶試劑盒 抗氧
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