BL6013 線粒體分離/酶提取試劑盒 氧化磷酸化
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BL6013
- 產(chǎn)地 北京
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/4/3 8:43:51
- 訪問次數(shù) 23
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/48S |
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貨號 | BL6013 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 利用專門試劑溫和勻漿組織和細(xì)胞,再采用差速離心法從勻漿中分離完整線粒體 |
線粒體分離和線粒體酶提取試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
線粒體分離/酶提取試劑盒 氧化磷酸化
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:
線粒體是半自主性細(xì)胞器,不僅是細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要場所,為細(xì)胞的活動提供能量,而且在許多生命活動中具有重要調(diào)控作用。因此,準(zhǔn)確和全面分離保持正?;钚缘木€粒體已經(jīng)成為許多研究的前提。
測定原理:
利用專門試劑溫和勻漿組織和細(xì)胞,再采用差速離心法從勻漿中分離完整線粒體;利用專門試劑,配合超聲波破碎線粒體,可以得到保持活性的線粒體酶。
試劑的組成和配制:
產(chǎn)品名稱 | BL6013-50T/48S | Storage |
試劑一:液體 | 50ml | -20℃ |
試劑二:液體 | 10ml | -20℃ |
試劑三:液體 | 10ml | -20℃ |
試劑四:液體 | 1ml | -20℃ |
說明書 | 一份 |
需自備的儀器和用品:
超聲波破碎儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
提取步驟:
1、準(zhǔn)確稱取約 0.1g 組織或收集約 500 萬細(xì)胞,加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑四,用冰浴勻漿器或研缽研磨。
2、4 ℃ 600 g 離心 5min。
3、棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,4 ℃ 11000 g 離心 10min。
4、上清液即胞漿提取物,可用于研究線粒體蛋白向胞漿的釋放。
5、沉淀為完整線粒體。含有完整的內(nèi)膜和外膜,并具有線粒體的生理功能??捎糜诰€粒體的生理功能等方面的研究。
6、在沉淀中加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑四,超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復(fù) 30 次),可用于線粒體酶活性測定。
7、在沉淀中加入 200uL 試劑三和 2uL 試劑四,超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復(fù) 30 次),可用于線粒體蛋白濃度測定。
注意事項
1、 分離線粒體和提取線粒體蛋白質(zhì)的所有步驟均需在冰上或 4℃進(jìn)行,所用溶液需冰浴或 4℃預(yù)冷。
2、 通常在分離線粒體時前后兩次離心速度選取 600g 和 11,000g,如果希望純度更高,但對線粒體的得率要求不高,前后兩次離心速度可以采用 1000g 和 3500g。
3、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
線粒體分離/酶提取試劑盒 氧化磷酸化