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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業(yè)專用試劑>生物試劑> 小鼠子宮內膜上皮原代細胞

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小鼠子宮內膜上皮原代細胞

參考價1-580/件
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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7194 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研實驗

本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

小鼠子宮內膜上皮原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的小鼠子宮內膜上皮采用膠原酶消化法,結合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠子宮內膜上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

小鼠子宮內膜上皮原代細胞

組織來源

子宮組織

英文名稱

Mouse Endometrial   Epithelial Cells

貨號

YS-01X7194

產品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

小鼠子宮內膜上皮原代細胞
細胞簡介:

小鼠子宮內膜上皮細胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱為基質細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內膜上皮細胞主要功能:①子宮內膜亦稱子宮黏膜,是指構成哺乳類子宮內壁的一層;②子宮內膜對動情素和孕激素都起反應,因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經周期)發(fā)生顯著的變化。子宮內膜與胚胎附植密切相關,在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對話”的過程中,子宮內膜上皮細胞充當了極其重要的角色。子宮內膜構成雌性哺乳動物子宮壁的內層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內膜上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

培養(yǎng)信息:

小鼠子宮內膜上皮原代細胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠子宮內膜上皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

小鼠子宮內膜上皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

公司產品:小鼠子宮內膜上皮原代細胞

MRC-5-EGFP+puro人胚肺成纖維細胞 MRC-5-EGFP+puro in human embryo lung fibroblasts MEM+10%Hyclone滅活血清+2ug/ml puromycin

核糖體S6蛋白激酶抗體

VWCE抗體

細胞纖毛內轉運同源蛋白140抗體

酶動力蛋白2抗體

淀粉樣肽前體蛋白抗體

上腺發(fā)育不全相關蛋白抗體

丘腦分泌素受體抗體(食欲素受體)

血管緊張素激活蛋白1抗體

鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體

TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標簽)

CL-0099HEC-1-A(人子宮內膜腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)   大鼠角膜內皮細胞培養(yǎng)基 100mL

MCF-7/Adr 腺癌/阿耐藥株

大鼠視網膜節(jié)細胞培養(yǎng)基 100mL

IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)

CoC1(懸浮) 卵巢癌

SMC-1(人胸膜瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

HL-7702人正常肝細胞   HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS

小鼠子宮內膜上皮原代細胞淀粉樣肽前體蛋白抗體

非洲綠猴腎細胞;VERO

ATF2 Others Human ATF2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   (陽性對照)

JEC, 人子宮內膜腺癌細胞系 胚肺細胞,SL-7細胞 SNU-182(人肝癌細胞)

人臍靜脈平滑肌細胞HUVSMC

倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11

鐵螯合酶抗體

鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體

mCF, 小鼠心臟成纖維細胞

原肌球蛋白抗體

丙型肝炎病毒NS4B抗體

類狀瘤病毒18 E6抗體

TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標簽)

 


操作步驟:

小鼠子宮內膜上皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。





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