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豬骨髓間充質干原代細胞

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7031 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研實驗

豬骨髓間充質干原代細胞

豬骨髓間充質干原代細胞

豬骨髓間充質干細胞(BMSC)分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統(tǒng)內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。

英文名稱

Porcine Bone   Marrow Mesenchymal Stem Cells

組織來源

骨髓

產品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產品貨號

YS-01X7031

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

生長特性

貼壁

產品名稱:豬骨髓間充質干細胞

組織來源:骨髓

產品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

豬骨髓間充質干原代細胞

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

方法簡介

公司實驗室分離的豬骨髓間充質干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的豬骨髓間充質干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

豬骨髓間充質干原代細胞豬骨髓間充質干原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

豬骨髓間充質干原代細胞

豬骨髓間充質干原代細胞

人羊膜細胞;WISH

胰島素樣生長因子結合蛋白7抗體

成對螺旋細絲蛋白抗體

2號染色體開放閱讀框15抗體

表皮生長因子受體底物8抗體

2號染色體開放閱讀框6抗體

間隙連接蛋白40抗體

DDRGK1蛋白抗體

9號染色體開放閱讀框62抗體

發(fā)狀分裂相關增強子-5抗體

TNFRSF4 Others Mouse 小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 人細胞裂解液 (陽性對照)

BACE1 Others Human BACE1 / ASP2 人細胞裂解液 (陽性對照)

羅猴胎腎細胞;MA104

CALCB Others Human CALCB / CGPR / Calcitonin 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

NHEK adult pooled Pellet 正常人類表皮角質細胞團塊(捐獻者,混合來源) > 1 mio.cells 雪旺細胞培養(yǎng)基SCM

CD40LG Others Canine CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解液 (陽性對照)

RSV-G Others Respiratory syncytial   virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G   / RSV-G 人細胞裂解液 (陽性對照)

FLT4 Others Human VEGFR3 / FLT4 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞)5×106cells/瓶×2

豬骨髓間充質干原代細胞2號染色體開放閱讀框6抗體

HS 683(人腦膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 生孢梭菌

小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY

PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1

T24-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構建穩(wěn)定株)人膀胱癌細胞 T24-EGFP (CMV-EGFP leiviral   consuct stable sain) of human bladder cancer cells 1640+10% FBS

CCL24 Others Human CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

9號染色體開放閱讀框46抗體

BTB-kelch蛋白家族10抗體

Vero(非洲綠猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1

G1氨基A型受體相似蛋白2抗體

核基質蛋白22

腸高血糖素相關肽抗體

TNFRSF4 Others Mouse 小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 人細胞裂解液 (陽性對照)

 

豬骨髓間充質干原代細胞

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。






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