抗體純化試劑盒使用說明書（現(xiàn)貨）

抗體小量純化試劑盒
產(chǎn)品貨號ZKCY-18110
Protein A 對不同來源IgG 結(jié)合劑量
高親和性（如兔） 低親和性（如小鼠）
Protein A Sepharose 4 FF結(jié)合劑量35 mg/ml 3-10 mg/ml
Protein A Sepharose 4 FF每次用量40微升40微升（50%懸液）
每次純化抗體數(shù)量700 微克60-200微克
【操作步驟】
1. 將抗血清低溫15000g離心5分鐘,zui上層有漂浮物,zui下層有沉淀,取中間層。
優(yōu)化步驟:將離心后抗血清用0.22 μm針頭濾器過濾,可去除漂浮的脂肪和沉淀顆粒。
2. 振蕩懸勻Protein A Sepharose 4 FF。
3. 加40μl （50%）Protein A Sepharose 4 FF懸液到小離心柱。應(yīng)去掉Tip的。
4. 加600 μl Buffer A.到小離心柱，500g離心1分鐘。
5. 用Buffer A.1:1稀釋樣品。將稀釋的樣品加入小離心柱，加蓋，翻轉(zhuǎn)混勻Protein
A Sepharose與樣品，重復(fù)翻轉(zhuǎn)5分鐘，以使Protein A Sepharose與樣品充分結(jié)合，
100-150g離心1分鐘。
注： 為避免液體從離心柱底部流出, 混勻時加蓋并以蓋為下方.
6. 加600 μl Buffer A 到小離心柱，500g離心1分鐘。再加600 μl Buffer A 到小
離心柱，500g離心2分鐘。
7. 洗脫選擇：
對于mouse IgG1, rat IgG1, rat IgG2a, rat IgG2b and bovine IgG1 （或者不
確定的抗體亞型，使用下面（1）-（2）步洗脫.
對于mouse IgG2a, mouse IgG2b, mouse IgG3, rat IgG2c, human IgG1-IgG4,
rabbit IgG, guinea pig IgG1, guinea pig IgG2, bovine IgG2 and any other IgGs,
使用下面（2）步洗脫.
（1） 加0.1 mL Buffer B1 入柱子，并且柱子下面的接收管內(nèi)加入5 uL
Buffer C . 500g離心5分鐘.
（2） 加0.1 mL Buffer B2 入柱子，并且柱子下面的接收管內(nèi)加入13 uL
Buffer C . 500g離心5分鐘.
8. 柱子的更新，可安英文說明處理[完]

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