用中性粒細(xì)胞分離液提取中性粒細(xì)胞過程

銷售直線：021-31322331、一、實驗所需材料：

：865512910、

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　　1、中性粒細(xì)胞分離液（histopaque）

　　2、全血

　　3、Hanks液

　　4、離心管若干

　　5、離心機

　　6、移液管，移液搶

　　二、實驗步驟

　　1. 將所有試劑放至室溫。

　　2、用離心管收集全血1-2ml

　　3、加等體積的Hanks液至全血中組成

　　4、加2ml中性粒細(xì)胞分離液至裝至離心管中。

　　5、將全血和Hanks液加入分離液中

　　6、4℃，900r/min離心8-10min血液此時應(yīng)該分為6層：血漿、單核細(xì)胞層、分離液、中性粒細(xì)胞、其余的分離液、紅細(xì)胞沉淀層。如果分層不是很明顯，會導(dǎo)致分離的細(xì)胞不純，則需要重復(fù)分離。

　　7、用吸管小心地移去上面的三層（血漿、單核細(xì)胞和分離液）

　　8、小心地吸取中性粒細(xì)胞層和其下面的分離液層，轉(zhuǎn)移至一個干凈的離心管中。

　　9、加Hanks液3ml，后4℃，900r/min離心8-10min，棄上清，留沉淀，重復(fù)2次。

　　10、如果細(xì)胞用來提RNA，可加Trizol 1ml保存。


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