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生物芯片法檢測沙眼衣原體抗體

時間:2009/9/25閱讀:407
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生物芯片法檢測沙眼衣原體抗體

 

    [檢測方法生物芯片法

    [方法學原理以微孔濾膜為載體,利用微陣列技術將純化的沙眼衣原體(CT)特異性蛋白固定于同一膜片上,并利用微孔濾膜的滲濾、濃縮、凝集作用,使抗原抗體反應在固相膜上快速進行,再以免疫金作為標記物直接在膜上顯色。顯色后的芯片放人芯片識別儀,在軟件的支持下對不同點陣的灰度值進行分析。

    [標本準備取新鮮末梢血或靜脈血,分離血清后,如果試驗在采血后24h不能進行,應將其在-20環(huán)境中保存。檢測時,應使樣本恢復至室溫。

    [試劑]

    1.蛋白芯片

    2.試劑A(洗滌液

    3.試劑B(金溶膠試劑

    [儀器蛋白芯片檢測系統(tǒng)

    [檢測步驟]

    1.在芯片上標記樣品編號。

    2.在芯片盒窗口內滴加4滴試劑A,使膜表面*浸濕。

    3.待*滲入后,室溫環(huán)境中放置lmin,加待檢血清100u1。

    4.待血清*滲入后,及時滴加6滴試劑B。

    5.待試劑B*滲入后,滴加6滴試劑A。

    6.反應完畢后30rain內,將芯片放人餅片閱讀系統(tǒng)進行分析。

    [結果判斷]

    檢測結果1CT陰性,提示沒有被感染。

    檢測結果2CT陽性,提示被CT感染。

    [正常參考值沙眼衣原體抗體陰性

    [注意事項]

    1.從28環(huán)境中取出的芯片須在室溫環(huán)境中平衡至少10min后方可使用。

    2.采取血樣時患者無須禁食。

    3.新鮮血樣在28環(huán)境下存放不要超過48h;長期保存的樣本應在-20以下環(huán)境中凍存,避免反復凍融。

    4.芯片反應窗口中的膜不能損傷或受潮:

    l芯片應在有效期內使用。若陽性控制點不顯色說明芯片已失效,換新的芯片重做。

    6.殘余的標本與使用過的芯片盒按生物危險品進行消毒處理。

    7.操作時要戴手套,檢測完畢*洗手。

    8.如不慎讓任何試劑接觸眼部,立即用大量清水沖洗。

    9.其他問題請參見芯片操作指南或與本公司。

    [臨床意義沙眼衣原體有15種血清型,其中A、BBa、C4種血清型主要與地方性沙眼有關;DK型可在生殖道感染、結膜炎和嬰兒肺炎中發(fā)現;L1、L2L33種血清型可引起性病淋巴肉芽腫。泌尿生殖道疾病如女性的宮頸炎、盆腔炎、子宮內膜炎、男性的附睪炎、兩性的尿道炎、直腸炎均可由沙眼衣原體引起。

 

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