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內質網
內質網是由一層單位膜圍成的連續(xù)的網狀膜系統(tǒng)，可分為糙面內質網（Rough Endoplasmic Reticulum，RER）和光面內質網（Smooth Endoplasmic Reticulum，SER）。
內質網染色的意義
1、觀察內質網形態(tài)結構：
染色后可以在顯微鏡下清晰地觀察到內質網的形態(tài)、大小、分布以及與其他細胞器的關系。這有助于深入了解內質網在不同細胞類型、不同生理狀態(tài)下的結構特點，為研究內質網的功能提供基礎。
2、疾病診斷
在某些疾病狀態(tài)下，內質網的結構和功能會發(fā)生改變。通過內質網染色可以觀察到這些變化，為疾病的診斷提供線索。例如，在一些神經退行性疾病、肝臟疾病和癌癥中，內質網的形態(tài)和分布可能會出現異常。
3、病理機制研究：
有助于研究疾病發(fā)生發(fā)展的病理機制。例如，在一些內質網應激相關疾病中，內質網染色可以揭示內質網應激的程度和持續(xù)時間，以及內質網應激對細胞功能和存活的影響。
ER-Tracker介紹
ER-Tracker是一種用于標記和研究細胞內質網的熒光探針。它能夠特異性地結合內質網，發(fā)出明亮的熒光信號，使研究人員能夠在顯微鏡下清晰地觀察內質網的形態(tài)、結構和動態(tài)變化。ER-Tracker廣泛應用于細胞生物學、生物醫(yī)學等領域，為研究內質網的功能和相關疾病提供了重要的工具。
應用原理
ER-Tracker通常是一種小分子熒光染料，其分子結構中含有能夠與內質網特異性結合的基團。當ER-Tracker進入細胞后，會通過擴散或主動運輸等方式進入內質網，并與內質網中的特定分子結合。這種結合是高度特異性的，使得ER-Tracker能夠在細胞內選擇性地標記內質網，而不與其他細胞器發(fā)生非特異性結合。不像傳統(tǒng)的DiOC6(3)，該系列探針幾乎不對線粒體著色，且在較低濃度即可實現對內質網的染色，且對細胞幾乎無毒性。使用以下提供的優(yōu)化步驟對活細胞染色后用醛固定，可以部分保留活細胞的染色特征。
運輸和保存方法
冰袋運輸。≤-20℃避干燥保存，一年效期。避免反復凍融。
使用方法
使用前將ER-Tracker Blue-White DPX 回溫至室溫，并簡短離心使該DMSO溶液至管底。
將1 mM ER-Tracker Blue-White DPX儲存液按照實驗要求稀釋至工作濃度，推薦工作濃度 100 nM-1µM。建議在不影響 實驗結果的前提下盡量使用較低濃度探針，以避免由于濃度過高染色導致的假象。
注：使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡鹽溶液（HBSS/Ca/Mg）稀釋該探針進行染色，可得到最佳實驗結果。
染色對于貼壁細胞，吸除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基，用HBSS清洗細胞，加入預熱的染料工作液于37℃孵育細胞15-30 min。吸除染色液，加入不含探針的新鮮培養(yǎng)液，并在熒光顯微鏡下觀察細胞。
注：由于ER-TrackerBlue-White DPX 探針具有較高光敏感性，會產生波動較大的發(fā)射吸收峰值，使用長通 DAPI 濾光片效果理想。另，操作過程中需盡量避光。
常見問題
Q: 請問固定后的死細胞還能染上嗎？
A: 該探針主要染的是活細胞的內質網，固定樣本基本染不上色。
Q: 染色之后可以加抗熒光淬滅劑防止熒光淬滅嗎？
A: 活細胞的染色，不需要加抗熒光淬滅封片液。
Q: 請問mito-tracker green 和 ER-traker red是同時染還是分開依次染，染完后熒光可持續(xù)多久（也就是在多長時間內還可以檢測）？
A: 建議分開依次染色，熒光均存在淬滅的現象，染色完建議盡快檢測，一般1小時內檢測熒光強度基本變化不大。
相關產品
產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
ER-TrackerBlue-White DPX, for live-cell imaging | 40761ES50 | 50µl |
ER-TrackerGreen (BODIPY® FL Glibenclamide), for live-cell imaging | 40763ES20 | 20µl (1mM) |
ER-TrackerRed (BODIPY® TR Glibenclamide), for live-cell imaging | 40764ES20 | 20µl (1mM) |
