聯(lián)系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年
- 聯(lián)系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
產(chǎn)品介紹
Hoechst 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強烈的藍色熒光，對細胞的毒性較低。Hoechst常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測，也可以用于普通的細胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。
技術原理
DNA 結合：Hoechst能夠特異性地與雙鏈DNA結合，通過插入到DNA的小溝中，形成穩(wěn)定的復合物。這種結合方式使得染料的熒光特性發(fā)生改變，在特定波長的激發(fā)光下發(fā)出藍色熒光。
熒光特性：Hoechst在紫外光或近紫外光激發(fā)下發(fā)出藍色熒光，其激發(fā)波長通常在350 nm左右，發(fā)射波長在460nm左右。這種藍色熒光具有較高的亮度和對比度，能夠清晰地顯示細胞核的形態(tài)和結構。
Hoechst 33258/ Hoechst 33342的區(qū)別
Hoechst 33258在活細胞中DNA的AT序列富集區(qū)域的小溝處與DNA結合，廣泛用于細胞凋亡檢測，染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。兩者區(qū)別不大，但是Hoechst 33342對細胞的毒性作用更小一些，因此一般Hoechsts 33258用于細胞固定后再染色，而Hoechst 33342則可以對活細胞直接進行染色。
使用方法
用PBS或合適的緩沖液制備0.5 - 10 μg/mL Hoechst 33258染色液。
細胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液，對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。
在 37℃培養(yǎng)細胞10 - 20 min。
用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。
直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350 nm，發(fā)射波長460 nm。
結果展示
正常細胞的細胞核被Hoechst染色后，呈現(xiàn)出明亮的藍色熒光。細胞核的形態(tài)和結構清晰可見。
常見問題
Q：如何做到同時染色溶酶體和細胞核的？
A：建議用Hoechst 33258/ Hoechst 33342染色細胞核，這個染料可以直接染活細胞不需要固定操作。
Q：DAPI和Hoechst染料相當類似，如何二選一？
A：DAPI是非常通用的藍色熒光染料，用于細胞核復染。對固定和透化的細胞/組織，具有非常明亮的細胞核標記。然而，此染料被認為是半滲透至不滲透的染料，用于活細胞染色的結合不一致。Hoechst 33342是一種細胞膜滲透性的染料，具有同DAPI的結合機制和熒光特征。非常適合用于活細胞成像，效果就如同DAPI用于固定細胞染色。
相關產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 規(guī)格 |
Hoechst 33258 | 40729ES10/76/80 | 10mg/500mg/1g |
Hoechst 33258 Stain Solution (1mg/mL) | 40730ES03 | 1ml |
Hoechst 33342 | 40731ES10 | 10mg |
Hoechst 33342 Stain Solution(1mg/ml) | 40732ES03 | 1 mL |
