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細(xì)胞分選是指根據(jù)細(xì)胞所具有的特性把某種特定的細(xì)胞亞群從混合的細(xì)胞樣品中分離出來的一種技術(shù),它是對某一特定細(xì)胞進(jìn)行生化分析和功能分析的前提和基礎(chǔ)。
表1. 常見細(xì)胞分選技術(shù)對比
常見細(xì)胞分選技術(shù) | 分選結(jié)果 | 安全性 | 其他 |
細(xì)胞磁性分選技術(shù) | 1、適宜進(jìn)行單Marker分選 2、分選純度好,得率高 3、分選對細(xì)胞無損,尤其適用于免疫細(xì)胞分選 | 1、納米級磁珠安全、可靠,無需額外去除 2、微米級別磁珠需要額外去除 | 1、不需要昂貴的設(shè)備、操作簡單 2、科研級、臨床級磁珠可選 |
流式細(xì)胞分選技術(shù) | 1、多Marker分選,純度高,得率好 2、傳統(tǒng)流式分選:高壓高速對細(xì)胞沖擊較大,細(xì)胞受損嚴(yán)重 | 1、容易交叉污染 2、帶熒光抗體使用存在爭論 | 1、設(shè)備昂貴、操作難度較大,需要專門操作人員進(jìn)行操作和數(shù)據(jù)分析 |
基于細(xì)胞密度的離心分選技術(shù) | 1、回收率較差 2、無法分選獲得特定細(xì)胞亞群 | 1、藥用級Ficoll液 |
由上表可知,細(xì)胞磁性分選技術(shù)由于其簡單快捷的操作,分選細(xì)胞純度好、得率高、活性好等特點,已成為目前使用廣泛的細(xì)胞分選技術(shù),同時搭配納米級磁珠(生物可降解基質(zhì),無需額外去除),可實現(xiàn)對所需細(xì)胞更安全、可靠的分選。
細(xì)胞磁性分選技術(shù)可進(jìn)行陽性、陰性細(xì)胞分選。陽性細(xì)胞分選一般搭配有柱分離(陽選抗體磁珠一步標(biāo)記),陰性細(xì)胞分選一般搭配無柱分離(陰選抗體加磁珠兩步標(biāo)記)。
表2. 陽性細(xì)胞分選、陰性細(xì)胞分選對比
細(xì)胞分選技術(shù) | 陽性細(xì)胞分選(有柱分離) | 陰性細(xì)胞分選(無柱分離) |
磁珠粒徑 | 粒徑<100 nm的磁珠 | 粒徑250 nm~4.5 μm的磁珠 |
磁珠標(biāo)記細(xì)胞 | 陽性抗體磁珠(帶一種需要細(xì)胞表面標(biāo)識抗體的磁珠)加入細(xì)胞懸液孵育,磁珠標(biāo)記需要的細(xì)胞。 | 生物素標(biāo)記抗體Cocktail(所有不需要細(xì)胞的表面標(biāo)識抗體)加入細(xì)胞懸液中孵育,鏈霉親和素磁珠再加入細(xì)胞懸液孵育,磁珠標(biāo)記所有不需要的細(xì)胞。 |
細(xì)胞分選 | 分離柱進(jìn)磁鐵,加入磁珠標(biāo)記細(xì)胞,加緩沖液洗出非標(biāo)記細(xì)胞,分離柱取出磁鐵,用活塞析出磁珠標(biāo)記細(xì)胞。 | 磁珠標(biāo)記細(xì)胞的試管入磁鐵,并孵育,倒出非標(biāo)記細(xì)胞,即為所需細(xì)胞。 |
優(yōu)點 | 分選細(xì)胞純度高、特異性高, 所需磁珠用量少。 | 需要的細(xì)胞未經(jīng)標(biāo)記。 |
缺點 | 可能會對細(xì)胞產(chǎn)生一定的激活作用 | 需要知道所有不需要細(xì)胞的表面標(biāo)識抗體,磁珠用量多,特異性稍差。 |
翌圣生物擁有高性能單克隆抗體研發(fā)平臺,憑借其豐富的抗體和磁珠等開發(fā)經(jīng)驗,全力開發(fā)推出細(xì)胞分選產(chǎn)品,提供高質(zhì)量的分選磁珠、耗材及設(shè)備,滿足客戶的研發(fā)和生產(chǎn)需求。目前已上新針對人免疫細(xì)胞的科研級CD3、CD4、CD8陽性分選磁珠,后續(xù)產(chǎn)品持續(xù)開發(fā)中。
表3. 翌圣分選磁珠系列產(chǎn)品選購指南
產(chǎn)品貨號 | 37601ES | 37605ES | 37609ES |
中文名稱 | 人CD3分選磁珠 | 人CD4分選磁珠 | 人CD8分選磁珠 |
基質(zhì) | 葡聚糖納米磁珠 | 葡聚糖納米磁珠 | 葡聚糖納米磁珠 |
配體 | Anti-CD3 antibody
| Anti-CD4 antibody
| Anti-CD8 antibody
|
粒徑 | 50-100 nm | 50-100 nm | 50-100 nm |
規(guī)格 | 2 mL | 2 mL | 2 mL |
分選能力 | Up to 1×109 cells | Up to 1×109 cells | Up to 1×109 cells |
儲存緩沖液 | 1 X PBS (pH7.2-7.4) containing 2 mM EDTA, 0.5% BSA buffer without Ca2+ | ||
有效期 | 2~8℃避光保存,有效期6個月,嚴(yán)禁凍存。 |
安全性高:磁珠粒徑與進(jìn)口競品等同,低毒。
效 果 好:純度高、活性高、回收率高。
操作方便:生物可降解基質(zhì)、無需額外去除。
質(zhì) 量 高:穩(wěn)定性高、兼容性高。
純度、活性、回收率測試:
圖1. 翌圣CD3、CD4、CD8分選磁珠和進(jìn)口競品富集免疫細(xì)胞的純度和回收率對比圖
備注:分別使用翌圣CD3、CD4、CD8分選磁珠與競品磁珠對PBMC樣本中的T細(xì)胞(細(xì)胞總量:1×107 )進(jìn)行富集,通過流式檢測分選得到的細(xì)胞組分中 CD3、CD4、CD8 T細(xì)胞純度,并計算比較 CD3、CD4、CD8 T細(xì)胞的回收率。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 分選能力 | 目錄價/元 |
Human CD3 Nanobeads 人CD3分選磁珠 | 37601ES05 | 2 mL | Up to 1×109 cells | 5685 |
Human CD4 Nanobeads 人CD4分選磁珠 | 37605ES05 | 2 mL | Up to 1×109 cells | 5685 |
Human CD8 Nanobeads 人CD8分選磁珠 | 37609ES05 | 2 mL | Up to 1×109 cells | 5685 |
以上磁珠,我司均可提供測試裝規(guī)格100 μL(分選能力:Up to 5×107 cells),可在翌圣商城免fei領(lǐng)取,或聯(lián)系當(dāng)?shù)劁N售申請。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 目錄價/元 |
Lymphocyte Separation Medium 1.077 淋巴細(xì)胞分離液1.077 | 40503ES60/76 | 100 mL/5×100mL | 219/989 |
Lymphocyte Separation Medium 1.084 淋巴細(xì)胞分離液1.084 | 40504ES60 | 100 mL | 546 |
對應(yīng)流式抗體詳見專題:CD分子流式抗體選購指南