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漲知識|qPCR專場八：細(xì)節(jié)-認(rèn)真的態(tài)度和科學(xué)的精神
漲知識|qPCR專場八：細(xì)節(jié)-認(rèn)真的態(tài)度和科學(xué)的精神熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對PCR過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)需要用心對待，各種細(xì)小的偏差都會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確或難以理解的現(xiàn)象。小事成就大事，細(xì)節(jié)成就。接下來小翌給大家來介紹一下熒光定量PCR中需要注意的小細(xì)節(jié)。RNA保證可用RNA的完整度在很大程度上 -
精品推薦|miRNA的定量分析，這里有方案！MicroRNAs（miRNAs）是一種大小約21-28個(gè)堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個(gè)堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成。miRNA主要與靶基因mRNA3‘端非編碼區(qū)域特異性結(jié)合，調(diào)控轉(zhuǎn)錄后靶基因mRNA的翻譯過程，從而阻斷mRNA翻譯和促進(jìn)mRNA降解導(dǎo)致蛋白質(zhì)表達(dá)降低。miRNA的作用涉及個(gè)體發(fā)育、組織分化、細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡等多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展。圖.miRNA體內(nèi)合成示意miRNA研究的關(guān)鍵是如何
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想快速區(qū)分不同胰蛋白酶？這三點(diǎn)是關(guān)鍵！
想快速區(qū)分不同胰蛋白酶？這三點(diǎn)是關(guān)鍵！胰蛋白酶大致可以分為兩種，一種是傳統(tǒng)使用的動物源性的胰蛋白酶，普遍發(fā)現(xiàn)于脊椎動物消化系統(tǒng)，直接提取自牛或豬的胰腺組織；另一種則是非動物源性胰蛋白酶，即利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的重組胰蛋白酶。01應(yīng)用區(qū)別胰蛋白酶理化性質(zhì)胰蛋白酶是從牛、豬、羊的胰臟提取，通過多重結(jié)晶方式純化，并進(jìn)一步采取層析及超濾技術(shù)制備而得。該酶易溶于水，不溶于、乙醇、等有機(jī)溶劑。在pH1.8時(shí)，酶短時(shí)間煮沸幾乎不失活，在堿溶液中加熱則會變性沉淀。Ca2+對酶有保護(hù)和激活作用，胰蛋白酶的等電點(diǎn)為 -
國際期刊 ┃ 翌圣克隆試劑盒助力浙大團(tuán)隊(duì)揭示病原菌宿主適應(yīng)新機(jī)制
國際期刊┃翌圣克隆試劑盒助力浙大團(tuán)隊(duì)揭示病原菌宿主適應(yīng)新機(jī)制2023年9月2日，浙江大學(xué)樂敏課題組在NationalScienceReview（IF=20.600）上發(fā)表研究論文“GenomedegradationpromotesSalmonellapathoadaptationbyremodelingfimbriae-mediatedproinflammatoryresponse”，該論文使用翌圣一步法快速克隆試劑盒（Cat#10911）構(gòu)建菌毛基因缺失株，以禽宿主專性病原——雞白痢沙門菌為模 -
上新 | 雙鏈甲基化建庫重磅上市，助力表觀遺傳學(xué)研究
上新|雙鏈甲基化建庫重磅上市，助力表觀遺傳學(xué)研究01表觀遺傳1942年，ConradWaddington創(chuàng)造出了“表觀遺傳學(xué)”一詞，用以定義基因型未發(fā)生改變而表型改變的現(xiàn)象，以解釋發(fā)育的各個(gè)方面。大約3/4個(gè)世紀(jì)以后，我們發(fā)現(xiàn)基因表達(dá)模式傳遞的表觀遺傳機(jī)制并不依賴于DNA序列的改變，而是通過改變?nèi)旧|(zhì)的狀態(tài)，而染色質(zhì)狀態(tài)同時(shí)是我們遺傳信息的生理學(xué)形式。表觀遺傳的調(diào)控機(jī)制包括多種方式，圖1主要介紹其中的3種：DNA甲基化、組蛋白修飾（圖1中顯示乙?；图谆揎棧┖头蔷幋aRNA導(dǎo)的調(diào)控。02表觀遺 -
新品│高效尿嘧啶特異性切割酶：精準(zhǔn)清除dU堿基！
新品│高效尿嘧啶特異性切割酶：精準(zhǔn)清除dU堿基！Uracil-SpecificExcisionReagent是由尿嘧啶DNA糖基化酶（UracilDNAGlycosylase,UDG）和核酸內(nèi)切酶Ⅷ(EndonucleaseVIII,EndoⅧ)（戳鏈接了解詳情）兩種酶混合而成。UDG識別ssDNA或dsDNA上的dU堿基并形成AP位點(diǎn)，但磷酸二酯骨架結(jié)構(gòu)保持完整。EndoVIII的裂解酶活性能夠使AP位點(diǎn)的3′和5′端的磷酸二酯鍵斷裂，釋放無堿基的脫氧核糖，形成單核苷酸間隙。因此，Uracil -
漲知識 | qPCR專場六：一文讀懂qPCR文章金標(biāo)準(zhǔn)-MIQE
熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對PCR過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的，并且可以通過數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實(shí)驗(yàn)過程中，我們需要注意諸多細(xì)節(jié)，謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn)，拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)表高分文章，走上人生巔呢？日常在進(jìn)行qPCR時(shí)，需要注意多個(gè)操作細(xì)節(jié)，有時(shí)稍不留意就會 -
膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分，比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富；II型膠原在透明軟骨中含量豐富；III型膠原在皮膚、血管內(nèi)膜、腸道中含量豐富，彈性較好；IV型在晶狀體中含量豐富；V型主要分布在皮膚和血管壁中等。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上有不同類型，膠原蛋白由三個(gè)自身按左螺旋排列的多肽鏈構(gòu)成，三條相互獨(dú)立的膠原蛋白肽鏈依靠甘氨酸之間形成的氫鍵維系三股螺旋相互纏繞的結(jié)構(gòu)[1]。商業(yè)上有天然和人工合成兩種不同的生產(chǎn)路徑，在醫(yī)療、美容、醫(yī)學(xué)和科學(xué)研究領(lǐng)域有
