細胞瞬時轉染

服務簡介：

     細胞轉染的基本原理將外源DNA克隆到載體上后導入細胞，借助宿主細胞表達載體上的目的片段，從而使目的基因在細胞中發(fā)揮功能。目前轉染方法有多種，如脂質體轉染法、磷酸鈣－DNA共沉淀法、電穿孔轉染法、腺病毒感染等。
      常規(guī)轉染技術可分為兩大類，一類是瞬時轉染，另一類是穩(wěn)定轉染，前者轉染的外源DNA不整合到宿主染色體中，通常表達只持續(xù)幾天，一般在轉染24-72小時后檢測。后者轉染的外源DNA將整合到宿主染色體中，可持續(xù)性表達，一般可用于穩(wěn)定細胞株的構建。
     本公司使用商用化的lipofectamine2000作為轉染試劑，所有實驗步驟及試劑按照廠家建議的用量。實驗中使用轉染試劑在常溫條件下同待轉染質粒/RNA在培養(yǎng)基中組裝成復合體，按照一定的比例將上述裝配產物加入到對數生長期的細胞中。待培養(yǎng)一段時間后，可結合下游實驗檢測項目。

 服務流程：

1. 質粒：
   a. 進行預實驗，通過轉染含有報告基因的質粒優(yōu)化轉染條件；
   b. 轉染條件確定后，按照客戶方案進行轉染；
   c. qPCR或Western Blot檢測轉染效率。
   （2）SiRNA：
   a. 根據基因序列，設計并合成siRNA；
   b. 進行預實驗，通過轉染帶有熒光標記的陰性對照siRNA優(yōu)化轉染條件；
   c. 通過qPCR和Western Blot驗證siRNA的沉默效率，篩選siRNA*使用濃度。

客戶提供：
待轉染細胞株及細胞培養(yǎng)的相關信息，待轉染的質粒信息，目的蛋白一抗；待轉染的SiRNA，預測被調控基因的蛋白的抗體。
交付內容：
瞬時轉染的實驗報告單，含實驗原始實驗圖片、實驗方法、siRNA序列等。

收費標準/服務周期/提供結果：
詳談，我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。

【本公司合作項目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實驗，病理實驗，免疫學實驗，細胞實驗，動物實驗，蛋白組學實驗等，能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務！

詳情請咨詢：

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細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染

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