樣本采集:根據(jù)實驗需求,采集適量人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本。血清樣本需待血液自然凝固后離心獲取;血漿樣本則需在采血時加入合適抗凝劑后離心分離;細(xì)胞培養(yǎng)上清按標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)流程收集,并離心去除細(xì)胞碎片等雜質(zhì)。采集后的樣本應(yīng)妥善保存,避免反復(fù)凍融影響檢測結(jié)果。
試劑盒準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,在室溫(20℃ - 25℃)平衡 30 分鐘,使試劑盒內(nèi)各試劑溫度均勻,同時準(zhǔn)備好移液器、吸頭、酶標(biāo)儀等實驗器材,并確保其性能正常。
加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本及空白對照按規(guī)定體積準(zhǔn)確加入微孔板相應(yīng)孔中,輕輕振蕩混勻,使樣本與包被抗體充分接觸,然后在設(shè)定溫度下孵育一定時間。
洗板:孵育結(jié)束后,棄去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,以徹di清除未結(jié)合的物質(zhì),減少非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干,防止殘留液體影響后續(xù)反應(yīng)。
加酶標(biāo)抗體:向各孔加入適量酶標(biāo)抗體,振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止:加入底物顯色液,在避光條件下孵育,待顏色變化至合適程度時,加入終止液終止反應(yīng),使反應(yīng)停止在最佳檢測狀態(tài)。
結(jié)果測定:立即使用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長下測定各孔 OD 值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣本中 Oncostatin M 的含量。
高靈敏度:能夠精準(zhǔn)檢測到極低濃度的 Oncostatin M,滿足對微量樣本或低表達(dá)水平的檢測需求。
特異性強(qiáng):試劑盒中的抗體對 Oncostatin M 具有高度特異性,與其他類似物質(zhì)交叉反應(yīng)極小,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
重復(fù)性好:同一批樣本多次檢測結(jié)果穩(wěn)定,變異系數(shù)小,為科研及相關(guān)應(yīng)用提供可靠且可重復(fù)的數(shù)據(jù)支持。
腫瘤研究:用于探究 Oncostatin M 在腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移過程中的作用機(jī)制,輔助腫瘤診斷和預(yù)后評估。
免疫調(diào)節(jié)研究:研究 Oncostatin M 在免疫細(xì)胞活化、炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)等方面的功能,助力免疫相關(guān)疾病的研究。
細(xì)胞生物學(xué)研究:了解 Oncostatin M 對細(xì)胞生長、分化和凋亡的影響,推動細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展。