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小鼠Dickkopf相關蛋白4(DKK4)檢測試劑盒為什么實驗過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應更充分,振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩,可以加快、加強抗原抗體分子間的相互碰撞接觸,使得反應過程更加*,OD值通常會比未振蕩孵育的結果要高;洗滌過程振蕩,可以使洗板更干凈,在很大程度上能降低背景值,同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度,具體操作請參見說明書。
小鼠Dickkopf相關蛋白4(DKK4)檢測試劑盒何時終止ELISA反應。
ELISA實驗zui終需要酶催化底物顯色反應來完成,在合適時間終止反應是ELISA實驗成功的重要因素。在HRP-TMB酶促反應系統(tǒng)中,當zui高濃度標準品顏色不再變深,倒數2-3個濃度標準品顏色開始有淺藍色時,便需要終止反應;或者也可以根據zui高濃度標準品孔在620nm的OD值來決定,OD620=0.9-0.95之間時即可終止。
小鼠Dickkopf相關蛋白4(DKK4)檢測試劑盒為什么酶標儀讀數時必須選用雙波長。
首先,酶標儀使用前務必預熱10-15min,使測讀結果更穩(wěn)定。其次,ELISA實驗采用雙波長測定吸光度,可以排除單波長檢測時的測定干擾(標本的濃度,干擾色等)。一般采用zui大波長作為參照波長,在參照波長下,檢測物的吸光值zui小,檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收;因此,雙波長測定,可zui大限度的消除指紋、雜質及不透光的物質對酶標儀讀數帶來的誤差,以保證實驗數據的準確度。
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