干細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)

根據(jù)干細(xì)胞生長(zhǎng)的恃點(diǎn)，傳代方法有3種：懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代、半懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代（Hela細(xì)胞）、貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞傳代。

培養(yǎng)細(xì)胞傳代根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代；部分貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用直接吹打可傳代；懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1.  貼壁細(xì)胞的消化法傳代：

（1）吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。

（2）D-Hanks液洗2～3次。

（3）向瓶?jī)?nèi)加入適量消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

（4）然后吸掉或倒掉消化液后再加適量新的消化液，輕輕搖動(dòng)再倒掉大部分消化液，僅留少許進(jìn)行消化（也可不采用上述步驟直接加消化液進(jìn)行消化）。

注意事項(xiàng)：

1.  胰蛋白酶要預(yù)溫，溫度37℃左右為宜℃。

2.  離心轉(zhuǎn)速要合適，轉(zhuǎn)速過(guò)低，不能有效分離細(xì)胞，離心速度過(guò)大，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)擠壓細(xì)胞造成損傷甚至死亡。

3.  要定時(shí)觀察干細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)污染，應(yīng)及時(shí)處理。

2183-17-7 1-萘磷酸鈉鹽 英文名稱： CAS號(hào)： ALPHA-NAPHTHYL PHOSPHATE DISODIUM SALT

81012-89-7 1-萘磷酸鈉鹽(+4°C) 英文名稱： CAS號(hào)： 1-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOSODIUM SALT MONOHYDRATE

67000-89-9 1-芘丁醇 99％ 英文名稱： CAS號(hào)： 1-PYRENEBUTANOL

3443-45-6 1-芘丁酸;4-(3-芘基)丁酸 英文名稱： CAS號(hào)： 1-Pyrenebutyric acid;4-(3-Pyrenyl)bytyric acid

19694-02-1 1-芘甲酸 97％ 英文名稱： CAS號(hào)： 1-PYRENECARBOXYLIC ACID

711-79-5 1-羥基-2-乙酰萘 英文名稱： CAS號(hào)： 1'-HYDROXY-2'-ACETONAPHTHONE

39968-33-7 1-羥基-7-氮雜苯并三氮唑 (HOAt)（2-8℃） 英文名稱： CAS號(hào)： 1-Hydroxy-7-azabenzotriazole

干細(xì)胞