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產(chǎn)品型號
品 牌ATCC
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-01-09 14:00:14瀏覽次數(shù):285次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞;HCCLM3價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞;HCCLM3價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 上皮細胞樣;胞質(zhì)內(nèi)有顆粒
生長特性 貼壁生長
特征特性 用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠,進行3次肺轉(zhuǎn)移篩選,取肺轉(zhuǎn)移瘤建成皮下接種后高度自發(fā)性肺轉(zhuǎn)移的肝癌細胞系。
培養(yǎng)條件
傳代方法
傳代情況 PN
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
植物種屬鑒定 PCR Mix 9100 次
3'-RACE 試劑盒10 次
90603B-5隨機引物法 DNA 探針生物素標記試劑盒5次
活性氧檢測試劑盒100 次
超氧化物歧化酶測試盒48 T
130595-100雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒100 次
維生素 B65g
十二烷基磺酸100g
miRNA cDNA *鏈合成試劑盒25 次
柱式腐殖酸清除劑30 次
CAS9048-46-8牛血清白蛋白5g
植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
BL21 菌種1mL蟾毒靈規(guī)格:20mg/支;98%
人前列腺成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠骨髓瘤細胞英文名稱:P3X63Ag8
NCI-H358(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
IBRS-2(豬腎細胞)5×106cells/瓶×2
COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠艾氏腹水細胞英文名稱:EAC
MCPC培養(yǎng)基添加劑/MCPC Medium Supplement每瓶添加于100ml MCPC培養(yǎng)基中5毫升國產(chǎn)/進口
茜素-β-半糖苷瓊脂/Aliz-Gal Agar用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計數(shù)250克國產(chǎn)/進口
L-O2(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腺英文名稱:EMT-6
人卵巢透明細胞細胞英文名稱:ES-2
倉鼠腎成纖維細胞英文名稱:BHK-21 [C-13]
MDA-MB-453(人腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:20次
產(chǎn)芽孢肉湯/Sporulation Broth產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
亞碲酸鹽肉湯基礎/亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎/lurite Broth Base金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng),每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml250克國產(chǎn)/進口
MFC(小鼠胃細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病細胞英文名稱:M1
人腸微血管內(nèi)細胞*培養(yǎng)基100mL
SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
HL-7702(人肝正常細胞)5×106cells/瓶×2
1% NaC1甘露醇發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
哺乳動物蛋白酶抑制劑1mL
MDS 42T7lac 菌種1mL
CAS25988-63-0多聚 -L- 賴氨酸 (7-15 萬 )25mg
90309-100紅細胞裂解液 B 型 ( 流式細胞分析用 ) 100mL
蛋白磷酸酶抑制劑混合液 11mL
天凈沙 Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒20 次
131150-1000山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根過氧化物酶標記1000μL
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