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人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1圖片

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產(chǎn)品型號

品       牌ATCC

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-01-10 16:41:01瀏覽次數(shù):364次

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人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1圖片售后:收到細胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,應出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱 人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移系;PGBE1圖片
形態(tài)特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  PGBE1由朱偉勇和鄭杰于1995年建系。源自人肺巨細胞癌系分離了多個單細胞克隆,經(jīng)體外侵襲實驗和裸鼠體內(nèi)接種相結(jié)合進行了初步鑒定后,挑選其中3個克隆化細胞亞系之一。該細胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤率均為100%,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為94%。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

先鋒溶液 ,100mg/mL1mL
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
土鹽10g
生物素標記的 Oligo(dT)5μg
CAS9007-49-2鮭魚精 DNA100mg
12-244Novablue(DE3) 菌種1mL
鹽酸壯觀1g
IPTG 溶液,200mg/mL1.5mL
蘇木色精10g
Western 封堵液500mL
CAS75277-39-3N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
60203-1硫酸新干粉1g
乙酰水楊酸100g
金胺 O5g
D- 氨基葡萄糖鹽10g
一步法 96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 真空法 )1次
CAS6342-17-21,4- 雙丙烯酰1g
131020-10Sephacryl S-400 基質(zhì)10mL
中草藥 DNAout100 次
lambda(λ)DNA5μg
過氧化氫酶 ( 牛肝 )1g
雙染細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-PE·7-AAD) 20 次人尿肌酐(UCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人硫酸褪黑色素(MS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人風疹毒抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人成纖維細胞生長因子23(FGF-23)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人4羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞瘦素(LEP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝

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