丙酮酸激酶（PK）紫外分光光度法測試盒 返回列表頁

商品介紹：
PK（EC 2.7.1.40）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化糖酵解過程中的最后一步反應(yīng)，是糖酵解過程中的主要限速酶之一，也是產(chǎn)生ATP的關(guān)鍵酶之一，因此測定PK活性具有重要意義。

測定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脫氫酶進一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映PK活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
測定操作表：

酶活性計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 18×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量）÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù)：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，30min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
（1）按樣本蛋白濃度計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位（U）。
DAO活性（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 36×A460÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T= 36×A460÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計算：
酶活性定義：在pH7.2，溫度為37℃條件下，每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
一步式 RT-PCR Mix 1mL  動物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒100 次

免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次  動物上皮細(xì)胞生長因子5mL

即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次  動物 RNAout(TRIzol) 250mL

即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒300 次  動物 RNAout(TRIzol) 100mL

通用型全基因組擴增試劑盒30 次  動物 DNAout250mL

電泳級丙溶液 ( 干粉型 )200mL  冷凍型血液 RNA 保存液100mL

電泳級甲叉雙丙 25g  酪蛋白50g

電泳級 TEMED1.5mL  昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次

電泳級過0.1gx10  昆蟲細(xì)胞裂解液50mL

電泳級尿素100g  口腔角質(zhì)細(xì)胞生長因子5mL
大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa檢測試劑盒

大鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)elisa分析檢測試劑盒

大鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)elisa檢測試劑盒

大鼠Ⅱ型膠原α1(COL2α1)elisa檢測試劑盒

大鼠Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)elisa檢測試劑盒
丙酮酸激酶（PK）紫外分光光度法測試盒動物 RNAout(TRIzol) 250mL  柱式質(zhì)粒 DNAout50 次

柱式動物 RNAout50 次  柱式質(zhì)粒 DNAout100 次

大提柱式動物 RNAout5次  柱式植物油 DNAout50 次

柱式動物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次  柱式植物葉綠體 DNAout15 次

血液 RNAout 50 次  柱式植物 RNAout50 次

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