詳細(xì)介紹
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-565傳代方法培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-565傳代方法冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 形態(tài)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
上皮樣;多角 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱(chēng) Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-565傳代方法
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Puromycin,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:7,10;D12S391:17,20;D13S317:10,13;D16S539:11,14;D18S51:17,18;D19S433:12,12;D21S11:29,30;D2S1338:16,16;D3S1358:12,17;D5S818:10,11;D6S1043:14,14;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:18,23;Penta E:13,14;TH01:8,9;TPOX:8,8;vWA:18,22;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-565傳代方法操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
副品紅堿分子式:305.37分子量:C19H19N3O英文名稱(chēng):PararosanilineCAS號(hào):467-62-9
3,5-二氟-2-吡啶英文名稱(chēng):3,5-two-2-fluoridecyanopyridinesCAS號(hào):298709-29-2分子式:140.09分子量:C6H2F2N2
4-羥-4-溴聯(lián)英文名稱(chēng):4-hydroxy-4-CAS號(hào):29558-77-8分子式:249.11分子量:C12H9BrO
磺胺二甲異嘧啶英文名稱(chēng):TwomethylISOCAS號(hào):515-64-0分子式:278.33分子量:C12H14N4O2S
2,4,5-三溴甲英文名稱(chēng):2,4,5-threeCAS號(hào):3278-88-4分子式:328.83分子量:C7H5Br3
6-叔丁-4-羥喹啉英文名稱(chēng):6-tertbutyl-4-hydroxygroupCAS號(hào):444609-92-1分子式:201.2643分子量:C13H15NO
2-并咪唑英文名稱(chēng):2-aminobenzimidazoleCAS號(hào):934-32-7分子式:133.15分子量:C7H7N3
亞硫酸氫鉀英文名稱(chēng):SodiumbisulfiteCAS號(hào):7773/3/7分子式:120.17分子量:KHSO3
并四咪唑英文名稱(chēng):并四咪唑CAS號(hào):885051-07-0分子式:252.34分子量:C15H12N2S
乙醇鋁英文名稱(chēng):EthanolaluminumCAS號(hào):555-75-9分子式:162.16分子量:C6H15AlO3
11,12-二氫吲哚并[2,3-a]咔唑英文名稱(chēng):11,12-twohydrogenindolo[2,3-a]carbazoleCAS號(hào):60511-85-5分子式:256.31分子量:C18H12N2
福來(lái)根分子式:264.19分子量:C10H8N4O5英文名稱(chēng):FulaigenCAS號(hào):1672-88-4
2--4,6-二甲嘧啶英文名稱(chēng):2-two-4,6-CAS號(hào):767-15-7分子式:123.16分子量:C6H9N3
2,3-二氟溴英文名稱(chēng):2,3-twofluorinebromineCAS號(hào):38573-88-5分子式:192.99分子量:C6H3BrF2
3,5-二氯-4-羥吡啶英文名稱(chēng):3,5-two-4-hydroxypyridineCAS號(hào):17228-70-5分子式:163.99分子量:C5H3Cl2NO HKC(人胚腎上細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Caki-1, 人腎透明細(xì)胞膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞
宮頸英文名稱(chēng):caski
SMMC-7721(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Multi-tagged Protein Lysate(293T)/多標(biāo)簽蛋白裂解液(293T)100ug100uggersion
RL95-2(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CHO-K1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2
FLAG標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)125ul國(guó)產(chǎn)
小鼠視網(wǎng)膜色素上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BC-021(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠腸粘膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
7.5% NaHCO3溶液規(guī)格:100ml
人胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
McCown Woody Plant Vit Mix(Modified)BR100毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人卵巢紫杉醇耐藥株英文名稱(chēng):A2780/Taxol
醋酸鉛培養(yǎng)基/乙酸鉛培養(yǎng)基/Lead Acetate Medium用于細(xì)菌的硫氫試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
前列腺英文名稱(chēng):LNCaP
蠟樣芽孢桿菌計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分)英文名稱(chēng):PC-12(未分)
肉浸液肉湯培養(yǎng)基/肉浸液肉湯/Meat Infusion Broth溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT116-Cas9-565傳代方法V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂/胰酶大豆酵母浸膏瓊脂/TSA-YE/TSYEA用于單核細(xì)胞和李斯特氏菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞
IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H295R(人腎上腺質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion