大鼠支氣管平滑肌原代細胞

大鼠支氣管平滑肌原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠支氣管平滑肌細胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由支氣管分出的各級分枝，由支氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是，支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能：①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力，保持支氣管形態(tài)；②支氣管平滑肌特異的超微結構特點和調節(jié)機制是支氣管正常生理功能的基礎；③支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質，發(fā)揮免疫調節(jié)功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠支氣管平滑肌細胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠支氣管平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

LAN-5細胞，神經母細胞瘤細胞 人胎盤絨毛癌細胞,JAR細胞 人表皮角質細胞RNAHEK miRNA5 μg  胰腺癌組織源性原代細胞Many 1ml  786-O[786-0]細胞，腎透明細胞腺癌細胞 單核細胞白血病細胞,J-111細胞 兔原代小腸粘膜上皮細胞 人原代淋巴管內皮細胞

Claudin-11 peptide 少突膠質細胞跨膜蛋白抗原 0.5mgClaudin-11 peptide 少突膠質細胞跨膜蛋白抗原

HIST3H2A Protein Human 重組人 HIST3H2A / Histone H2A 蛋白

CD5L重組小鼠 CD5L / CD5 antigen-like 蛋白 Protein

VCAM1 Protein Mouse 重組小鼠 VCAM1 / CD106 蛋白 (His & Fc 標簽)

RELA重組人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 蛋白 (aa 1-306, GST 標簽) Protein

大鼠肉毒堿棕櫚?；D移酶2(CPT2)試劑盒 ，英文名： CPT2 ELISA Kit

Mouse angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

RatThyroglobulin,TGELISAKit 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGzms-A(MousegranzymesA)ELISAKit小鼠顆粒酶A

細胞長鏈羥脂酰脫氫酶(HYDROXYACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次

Raturokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit大鼠型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(rabbit GM-CSF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔肝細胞生長因子(rabbit HGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔透明質酸(rabbit HA)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔心脂肪酸結合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

大鼠支氣管平滑肌原代細胞小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒

HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神經生長導向因子Slit2試劑盒 96T/48T 進口分裝

DuckIerleukin2,IL-2試劑盒鴨白介素2(IL-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

棗椰樹(datepalm)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脫氫表雄同(DHEA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

GAD2重組小鼠 GAD65 / GAD2 蛋白 Protein

骨成型蛋白4(BMP4)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)

SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白

TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。