詳細介紹
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱:新城疫病毒中強毒(NDV-W)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
貨號:GOY-M6637
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
IKBKE/IKKi 核因子κB抑制蛋白E抗體 規(guī)格: 0.1ml*
phospho-c-Jun(Thr249) 磷酸化原基因c-Jun抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-G3BP1(Ser232) 磷酸化Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
DECR1 線粒體2,4-雙烯酰輔酶A還原酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml*
Paxillin 樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1mlCECR6 貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規(guī)格: 0.2ml*
REG1β/REG1 beta 胰島細胞再生因子β抗體 規(guī)格: 0.2mlASAM/ACAM 脂肪細胞特異性粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml*
CP1/G protein coupled receptor interacting protein 1 G蛋白偶聯(lián)受體相互作用蛋白1抗體(補體Clq TNF相關(guān)蛋白1) 規(guī)格: 0.2mlId1 DNA結(jié)合抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
SLC27A1 鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlDR6/CD358 瘤細胞調(diào)亡素/瘤壞死因子受體死亡受體6抗體 規(guī)格: 0.2ml*
PDZD6 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.1ml*
NCF/NCF4/p40phox 嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體 規(guī)格: 0.1mlCK I alpha/STK 絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶抗體Casein kinase Ⅰα(CKⅠα) 規(guī)格: 0.1ml*
SIRT6 沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-ERK5(Ser496) 磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體 規(guī)格: 0.1ml*
TSPAN2 四分子交聯(lián)體2抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2mlMyelin PLP 髓磷酯髓鞘蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml*
JMJD2A/KDM4A/JHDM3A 組蛋白去甲基化酶JMJ2A抗體 規(guī)格: 0.2mlAlpha-Synuclein/Syn/SNCA 核突觸蛋白α抗體 規(guī)格: 0.1ml*
LPL protein 內(nèi)皮脂肪酶 規(guī)格: 0.1mlSESN1/PA26 p53調(diào)控PA26核蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml*
Interferon alpha 6 干擾素α6抗體 規(guī)格: 0.2mlPol II/RNA polymerase II RNA聚合酶II抗體 規(guī)格: 0.2ml*
C11orf53 11號染色體開放閱讀框53抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-PTPRA(Ser180) 磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗體 規(guī)格: 0.1ml*
新城疫病毒中強毒(NDV-W)核酸檢測試劑盒pcos2EMBL
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA Kit
DNA包被溶液
pQE-17(pQE17)
Brown-Hopp革蘭法細染色試劑盒
大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA Kit
Flavobacterium aquatile medium
pCMV-Red Firefly Luc
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA Kit
非凍型血液DNA保存液(250 mL)
pMRS001.2-GFP (conol sensor)(pMRS001.2GFP)
Lyiola-Avwioro蘇木精染色液
大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA Kit
Emerson's yeast starch agar (eys)
pBID-UASC-FG(pBIDUASCFG)