大鼠骨髓單核原代細胞

大鼠骨髓單核原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠骨髓單核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞，在骨髓細胞中約占0.04%，被認為是破骨細胞的前體細胞，較外周血單個核細胞誘導(dǎo)的破骨細胞得率高、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多，純度高，較脾細胞誘導(dǎo)法分化效率高。骨髓單核細胞（BMMNCs）是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞，它屬干細胞類型。目前，大多數(shù)研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞，近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠骨髓單核細胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠骨髓單核細胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞)  CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞) 獼猴皮膚細胞;MMS7  HFSF細胞，人胚胎眼鞏膜成纖維細胞 啤酒酵母 小鼠髖動脈內(nèi)皮細胞;PIEC  TIGIT Others Human 人 TIGIT / VSTM3 小鼠原代大隱靜脈內(nèi)皮細胞 兔原代脊髓神經(jīng)元細胞

Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated

CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein

IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標簽)

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein

大鼠細胞外信號調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)試劑盒 ，英文名： ERK2 ELISA Kit

Mouse nerve growth guidance factor Slit2 ELISA Kit 小鼠神經(jīng)生長導(dǎo)向因子Slit2 試劑盒

MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HSV-IIgG單皰疹Ⅰ型病毒IgG(間接法二步法)

細胞ITK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-3大鼠白介素3

小鼠骨粘連蛋白(ON)試劑盒   96T/48T

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒   96T/48T

小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒   96T/48T

小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒   96T/48T

大鼠骨髓單核原代細胞小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒

HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1ELISAKit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAmylin試劑盒人胰淀素(Amylin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次

MonkeyInsulin,INSELISAKit猴胰島素(INS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

EFNA5重組大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 Protein

H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2 0.5mgH5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原)

SLAMF6重組人 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein

FCER1A Protein Human 重組人 FcERI / FCER1A 蛋白

MAP2K1 Protein Mouse 重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白 (His & GST 標簽)