詳細介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
AFP甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白ELISA Kit | AFP ELISA Kit | GOY-E99859 |
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
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性能:
1) 準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4) 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6) 有效期:6個月
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
品紅亞硫酸鈉瓊脂 250g 用于飲用水,水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證(GB標準)
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 250g 用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測定
噻孢霉素 1.25μg/支 每100ml無菌山梨酸麥康凱瓊脂基礎(chǔ)中加入1瓶噻孢霉素
腸道菌增菌肉湯(EE) 250g 用于腸道菌的增菌培養(yǎng)(GB標準)
TTC營養(yǎng)瓊脂 250g 用于細菌總數(shù)測定
LB肉湯 250g 用于分子生物學中大腸桿菌的培養(yǎng)
LB營養(yǎng)瓊脂 250g 用于分子生物學中大腸桿菌的培養(yǎng)
苯丙氨酸脫氨酶培養(yǎng)基 100 用于苯丙氨酸脫氨酶試驗
察氏瓊脂 250g 用于青霉,曲霉鑒定及保存菌種用(GB標準)
產(chǎn)毒培養(yǎng)基 250g 用于青霉,曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)
高鹽察氏瓊脂 250g 用于霉菌和酵母菌的計數(shù)(GB標準)
玉米粉瓊脂 250g 用于真菌培養(yǎng)
孟加拉紅培養(yǎng)基 250g 用于食品中霉菌及酵母菌總數(shù)測定
菌種培養(yǎng)基 250g 用于四環(huán)素檢定中蠟樣芽孢桿菌的培養(yǎng)(SN標準)
AFP甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白ELISA KitPPP2R3A 蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基3A抗體 規(guī)格: 0.2ml
HPCL2 植烷酰輔酶A羥化酶2抗體 規(guī)格: 0.2ml
ICOS/CD278 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體 規(guī)格: 0.2ml
ITIH1 衍生透明質(zhì)酸相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Hepatitis C Virus NS5a 丙型肝炎病毒NS5A抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-DES (Thr16) 磷酸化結(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml
phospho-ROCK1(Thr455/Ser456) 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-MBP(Tyr203) 磷酸化髓鞘堿性蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
CDCA3 細胞分裂周期相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein 細胞生抑制基因39蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
DGCR6L 無胸癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體(迪格奧爾格綜合征) 規(guī)格: 0.2ml
CCDC83 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin Alpha V + Beta 5 整合素αVβ5抗體 規(guī)格: 0.1ml