沙門氏菌核酸檢測試劑

沙門氏菌核酸檢測試劑

廣州健侖生物科技有限公司

產(chǎn)品規(guī)格：50T/盒；

 保存條件：避光 -20度 保存。

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沙門氏菌核酸檢測試劑

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從吸脂樣品分離架嘛！
a.置真空包裝樣品于篩網(wǎng)上，用含0.5ug/ml兩性霉素同200IU/ml慶大霉素，200ug/ml鏈霉素嘅PBS反復沖洗。沖洗過程中用刮刀喺畀沖洗無周圍攪動，輔助沖洗。
b.羅20ml組織放入裝有20ml PBS嘅50ml離心理，撈勻，700r/min離心5min。嗍跌含血水相。
2. PBS溶解BSA至終濃度4.0mg/ml（PBS/BSA）；隔除菌。配制膠原酶溶液，PBS/BSA溶解膠原酶同DNA酵素，終濃度勒分別為4.0mg/ml同0.02mg/ml，0.2uM濾膜隔除菌。
10ml溶液大約可以處理10ml肥膏樣品。
BSA
膠原酶A（膠原酶應反復試驗，以尋找*分離架嘛！濃度。經(jīng)驗表，胰酶活性低嘅膠原酶似乎可以更加好噉作用于肥膏組織）
DNaseI
3.用無菌刮刀將步驟1中剪碎嘅肥膏組織返到胰蛋白酶消化嘅燒瓶中，跟住加膠原酶，每ml組織加1ml。
4. 37℃80r/min擰保溫30min。注意觀察樣品溶解程度，若30min后得少地方組織未溶解，繼續(xù)下一步。想法則繼續(xù)消化，每隔5min觀察一次。再消化時間盡量唔超過15~20min。
5.消化嘅同時，用PBS稀釋PBS/BSA（4.0mg/ml BSA）至終BSA濃度0.2mg/ml。消化過程系準備磁珠嘅*時間。
6.消化樣品倒入50ml離心理（每理約20ml）。
7.吊筒式醫(yī)用臺式離心機室溫1500r/min離心5min。
8.液態(tài)脂同水相倒入另一50ml離心理。由于細胞沉淀chun易畀倒咗佢，使用無菌離心理。細胞沉淀略帶紅色，易見。若樣品消化濟或者膠原酶中胰酶活性偏高，樣品水相由於含有斷裂核酸會好黐。消化緩沖液中加DNA酵素可抹得甩地方核酸，但溶液可能仍有一定粘度。液相粘度高，倒瀉時都會帶出細胞，棄跌上清時擰有助于保留細胞沉淀。
自吸脂樣離
。.置樣于篩網(wǎng)真空飾，以含。.5ug / ml兩性霉素與200IU / ml慶大霉素，200ug / ml鏈霉素PBS復洗之。洗中以刮刀在被洗無旁撓，贊洗。
卜人.取20ml結納有20ml PBS之50ml離管，混沌勻，700r / min離5min。吸之含血水。
二.PBS化BSA終濃四.0mg / ml（PBS BSA。）；沈除菌。合膠原酶溶液，PBS / BSA化膠原酶與DNA嘻，終濃分為四.0mg想ml和。.02mg ml。，。.2uM濾膜沈除菌。
10ml溶液約可治10ml脂，。
BSA
膠原酶A（膠原酶應覆試，以求至分離濃。經(jīng)驗明，胰酶活性卑者膠原酶似能更好地用于脂合。
DNaseI
三.以無菌刮刀以漸1中剪碎之脂為刮至胰蛋白酶消化之燒瓶中，入膠原酶，每ml結加1ml。
四.三十七80r min旋動暖30min真。。觀此樣散，若30min后惟少結未散，又下一步。欲法續(xù)消，每5min觀一。更消時務不過十20min腮。
五.消之時，以PBS稀釋BSA（四PBS。.0mg / ml BSA）至BSA終濃。.2mg ml。。消化道之zui久者欲磁珠。
六.消化，傾入50ml離管（每管約20ml）。
七.吊筒式醫(yī)用臺式離心機室溫1500r / min離5min。
八.釋脂、水倒一50ml離管。以細胞澄極易棄，宜用無菌離心管。細胞澄略帶紅，易見。若是消極或膠原酶中胰酶活性偏高，是以含水斷核酸會甚？。消緩沖液中入DNA嘻可去也核酸，而溶液可仍有粘度。液相粘度高，傾時亦當帶出細胞，棄清時旋動裨存細胞澄。