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Seahorse數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析-OCR、ECAR基本原理介紹

時(shí)間:2023-11-10閱讀:694
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Seahrose是以創(chuàng)96孔微孔盤(pán)為平臺(tái),即時(shí)同步偵測(cè)有氧呼吸以及糖肆解作用的細(xì)胞代謝呼吸動(dòng)態(tài)分析儀,通過(guò)該儀器的協(xié)助,研究者以更快的速度、更簡(jiǎn)易的設(shè)計(jì)了解細(xì)胞以及線粒體如何運(yùn)用不同的受質(zhì)作為能量的來(lái)源、評(píng)估疾病與有氧代J及線粒體運(yùn)作狀態(tài)之交作用、分析代調(diào)節(jié)藥物對(duì)于生理的效應(yīng)、建立細(xì)胞品質(zhì)營(yíng)理系統(tǒng)、快速篩選出具開(kāi)發(fā)潛力之藥物及藥物毒性評(píng)估,可快速篩選出高質(zhì)量的細(xì)胞用于科研等多種不同應(yīng)用。

基本原理

Seahorse能量代謝分析儀是一種用于測(cè)量細(xì)胞能量代謝的儀器,可以通過(guò)測(cè)量細(xì)胞的耗氧率(OCR)和胞外酸化率(ECAR)來(lái)評(píng)估細(xì)胞的線粒體功能、糖酵解和氧化磷酸化等過(guò)程。OCR和ECAR的測(cè)量原理如下(圖1.1):

OCR(Oxygen Consumption Rate):OCR是指細(xì)胞對(duì)氧氣的消耗速率。Seahorse能量代謝分析儀通過(guò)測(cè)量細(xì)胞周?chē)囵B(yǎng)基中的溶解氧含量的變化來(lái)確定OCR。在測(cè)量過(guò)程中,細(xì)胞被置于特定的耗氧試劑中,如噻唑類化合物(例如,琥珀酸、馬拉酸)。這些試劑會(huì)與細(xì)胞內(nèi)的線粒體呼吸鏈相互作用,導(dǎo)致氧氣消耗速率的變化。Seahorse能量代謝分析儀通過(guò)測(cè)量耗氧試劑與細(xì)胞周?chē)囵B(yǎng)基中溶解氧含量的變化,計(jì)算細(xì)胞的OCR。

ECAR(Extracellular Acidification Rate):ECAR是指細(xì)胞外酸化速率,也可以理解為細(xì)胞產(chǎn)生的酸性代謝產(chǎn)物的釋放速率。Seahorse能量代謝分析儀通過(guò)測(cè)量培養(yǎng)基中pH值的變化來(lái)確定ECAR。在測(cè)量過(guò)程中,細(xì)胞被置于特定的酸化試劑中,如葡萄糖和丙酮酸鹽。這些試劑會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞糖酵解過(guò)程中乳酸的產(chǎn)生,從而引起培養(yǎng)基pH值的變化。Seahorse能量代謝分析儀通過(guò)測(cè)量培養(yǎng)基中pH值的變化,計(jì)算細(xì)胞的ECAR。


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