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日本生研單增李斯特菌診斷血清分型血清
廣州健侖生物科技有限公司
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廣州健侖生物有代理日本生研、丹麥SSI、德國Sifin、泰國血清:
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、乙肝、寨卡、黃熱病、黑熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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60-65℃是雙鏈DNA復(fù)性及延伸的中間溫度,DNA在65℃左右處于動態(tài)平衡狀態(tài)。因此,DNA在此溫度下合成是可能的。利用4種特異引物依靠一種高活性鏈置換DNA聚合酶。使得鏈置換DNA合成在不停地自我循環(huán)。擴(kuò)增分兩個階段。
第1階段為起始階段,任何一個引物向雙鏈DNA的互補(bǔ)部位進(jìn)行堿基配對延伸時,另一條鏈就會解離,變成單鏈。上游內(nèi)部引物FIP的F2序列首先與模板F2c結(jié)合,在鏈置換型DNA聚合酶的作用下向前延伸啟動鏈置換合成。外部引物F3與模板F3c結(jié)合并延伸,置換出完整的FIP連接的互補(bǔ)單鏈。FIP上的F1c與此單鏈上的Fl為互補(bǔ)結(jié)構(gòu)。自我堿基配對形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。以此鏈為模板。下游引物BIP與B3先后啟動類似于FIP和F3的合成,形成啞鈴狀結(jié)構(gòu)的單鏈。迅速以3' 末端的Fl區(qū)段為起點。以自身為模板,進(jìn)行DNA合成延伸形成莖環(huán)狀結(jié)構(gòu)。該結(jié)構(gòu)是LAMP基因擴(kuò)增循環(huán)的起始結(jié)構(gòu)。
第2階段是擴(kuò)增循環(huán)階段。以莖環(huán)狀結(jié)構(gòu)為模板,F(xiàn)IP與莖環(huán)的F2c區(qū)結(jié)合。開始鏈置換合成,解離出的單鏈核酸上也會形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。迅速以3’末端的B1區(qū)段為起點,以自身為模板。進(jìn)行DNA合成延伸及鏈置換.形成長短不一的2條新莖環(huán)狀結(jié)構(gòu)的DNA,BIP引物上的B2與其雜交。啟動新一輪擴(kuò)增。且產(chǎn)物DNA長度增加一倍。在反應(yīng)體系中添加2條環(huán)狀引物L(fēng)F和LB,它們也分別與莖環(huán)狀結(jié)構(gòu)結(jié)合啟動鏈置換合成,周而復(fù)始。擴(kuò)增的后產(chǎn)物是具有不同個數(shù)莖環(huán)結(jié)構(gòu)、不同長度DNA的混合物。且產(chǎn)物DNA為擴(kuò)增靶序列的交替反向重復(fù)序列。