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日本生研 單核細(xì)胞增生李斯特菌O群診斷血清
廣州健侖生物科技有限公司
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廣州健侖生物有代理日本生研、丹麥SSI、德國Sifin、泰國血清:
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、乙肝、寨卡、黃熱病、黑熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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4. 加入10 ml 預(yù)冷的Buffer P3,輕輕顛倒混勻,直到藍(lán)色全部消失,出現(xiàn)白色蛋白沉淀,冰上放置20min。(此步發(fā)生酸堿中和反應(yīng),pH值降低,使變性的DNA雙鏈結(jié)構(gòu)恢復(fù),其中的SDS可以充分與蛋白質(zhì)結(jié)合,使其析出)
5. 20 min后,6000 g 4℃離心25min。同時(shí),向柱子中加入5ml Buffer QBT,使其全部流過柱子,平衡柱子。如果是重復(fù)使用的柱子,先使其中的HCl全部流盡,然后加滿DDW清洗2遍柱子,后再加入Buffer QBT平衡柱子。
6. 剪一小塊紗布,折疊4層,放于柱子上部。將離心后的液體緩慢倒入紗布中,后擠壓紗布使其中的液體全部直接過濾到柱子中,使其充分流過柱子。(如果此步不只1個質(zhì)粒時(shí),擠壓不同質(zhì)粒的紗布時(shí),一定要換手套,避免污染質(zhì)粒)
7. 清洗柱子: 液體全部流過柱子后,向柱子中直接加滿Buffer QC,使其全部流過柱子,清洗2遍,棄去廢液。
8. 洗脫質(zhì)粒: 向柱子中加15ml Buffer QF,靠重力作用使其全部通過柱子,收集洗脫液。(注:要收集到一個新的管中)
9. 沉淀質(zhì)粒:向收集的液體中,加入0.7倍體積(即10.5 ml)異丙醇,輕輕混勻,6000 g 4℃離心25 min。(異丙醇可以充分沉淀質(zhì)粒,但同時(shí)會沉淀很多鹽分)
10. 清洗質(zhì)粒:離心后,注意質(zhì)粒貼壁的方向,應(yīng)從其側(cè)面倒掉廢液。然后加入10 ml 70%的乙醇,輕輕晃動(不能用槍吹散,否則會損失很多質(zhì)粒)。