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日本生研 單增李斯特菌鼠抗分型診斷血清
廣州健侖生物科技有限公司
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廣州健侖生物有代理日本生研、丹麥SSI、德國(guó)Sifin、泰國(guó)血清:
我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、乙肝、寨卡、黃熱病、黑熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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11. 沉淀質(zhì)粒:6000 g 4℃離心10min,輕輕吸棄廢液,將質(zhì)粒開(kāi)蓋晾置,使乙醇充分會(huì)發(fā)。(質(zhì)粒中的乙醇會(huì)影響后續(xù)反應(yīng)中的酶活性)
12. 溶解質(zhì)粒:用300ulDDW或TE溶解步驟11中的質(zhì)粒,轉(zhuǎn)移到新的1.5mlEP管中,做好標(biāo)記,檢測(cè)濃度。
13. 柱子回收:
(1) 先用自來(lái)水沖洗柱子內(nèi)外;
(2) 再用蒸餾水和DDW沖洗柱子內(nèi)外,后加滿DDW,使其全部通過(guò)柱子,清洗2次。
(3) 向柱子中加滿1 M HCl,柱子底部蓋上蓋子,頂部用封口膜封上,室溫放置過(guò)夜。(HCl可充分降解DNA)
多位點(diǎn)序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)是一種基于核酸序列測(cè)定的細(xì)菌分型方法,通過(guò)PCR擴(kuò)增多個(gè)管家基因內(nèi)部片段,測(cè)定其序列,分析菌株的變異,從而進(jìn)行分型。MLST是由多位點(diǎn)酶電泳(MLEE)衍生出來(lái)的一種分型方法,由Maiden等研究設(shè)計(jì),于1998年首先應(yīng)用于自然變異是的腦膜炎奈色球菌(Neisseria meningitides),后來(lái)被廣泛應(yīng)用于其它病原菌、環(huán)境菌和真核生物中。
與傳統(tǒng)分子生物學(xué)分型方法相比,MLST具有更高的分辨力,能將同種細(xì)菌分為更多的亞型,并確定不同ST型之間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系以及與疾病的聯(lián)系。MLST操作簡(jiǎn)單,結(jié)果能快速得到并且便于不同實(shí)驗(yàn)室的比較,已經(jīng)用于多種細(xì)菌的流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和進(jìn)化研究。隨著測(cè)序速度的加快和成本的降低,以及分析軟件的發(fā)展,MLST逐漸成為細(xì)菌的常規(guī)分型方法。MLST越來(lái)越多的被作為能進(jìn)行間菌株比較的常用工具,建立一種更為準(zhǔn)確的分型系統(tǒng)方法。MLST目前已經(jīng)成為了細(xì)菌分子流行病學(xué)研究的一種重要方法,可通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)與其它國(guó)家和地區(qū)的研究結(jié)果進(jìn)行比對(duì),從而更加全面的認(rèn)識(shí)本地區(qū)細(xì)菌流行的特征。