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日本生研 軍團(tuán)菌1-15群診斷血清
廣州健侖生物科技有限公司
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廣州健侖生物有代理日本生研、丹麥SSI、德國Sifin、泰國血清:
我司還提供其它進(jìn)口或國產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、乙肝、寨卡、黃熱病、黑熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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5、每個(gè)離心管加入1 ml TB,用移液器輕柔吹打重懸菌體。菌體*分散后,每管再加入9ml TB,將兩管重懸液合為1管,冰浴15 min。
6、750-1000 g ,4°C離心收集菌體。
7、加入1 ml TB,用移液器輕柔吹打重懸菌體。菌體*分散后,每管再加入7ml TB(終體積與原始菌液體積比為1:12.5)。
8、在8 ml重懸液中加入280μl DMSO冰浴15 min,分裝于預(yù)冷的離心管,每管100μl,在液氮中速凍,然后-70°C凍存?zhèn)溆谩?br />三、注意事項(xiàng)
1、所用器具的潔凈程度。這一點(diǎn)非常重要,所有與感受態(tài)有關(guān)的方法與文章必強(qiáng)調(diào)這一點(diǎn),其重要性毋庸置疑。
2、培養(yǎng)基的裝量。培養(yǎng)基的裝量是很重要的,這關(guān)系到菌體生長過程中的能量代謝問題,是有氧還是無氧生長。厭氧生長出來的菌體是做不出效率高的感受態(tài)的。建議裝量不要高于此值:培養(yǎng)基體積/三角瓶容量=100ml/500ml,50ml/250ml。
3、培養(yǎng)基的pH值。pH值并非單指配制或滅菌后的pH值,而且還包括整個(gè)搖瓶結(jié)束后的pH值。一般來說,接種前的pH值在6.8-7.2。等菌搖好后,可以測(cè)一下pH值,不要低于6.0,登革熱在6.5以上。這表示菌體的代謝為有氧代謝,生長狀態(tài)良好,按要求做,肯定效率不低。
4、培養(yǎng)后的OD值。這是一個(gè)非常重要的參數(shù),只是當(dāng)OD值達(dá)到一定的程度后,菌體要保持對(duì)數(shù)生長已經(jīng)不太可能,因此很多指導(dǎo)方法上強(qiáng)調(diào)OD不得大于 0.6、0.8等等。同時(shí),OD值大時(shí)菌體總量大,感受態(tài)數(shù)量要大一點(diǎn)。因此需要在OD值的兩方面影響中找一個(gè)平衡點(diǎn)。