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當前位置:安諾倫(北京)生物科技有限公司>>抗體開發(fā)>>特殊功能抗體制備服務>> 內(nèi)化抗體篩選
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所 在 地北京市
更新時間:2020-05-09 15:10:33瀏覽次數(shù):1746次
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抗體或肽段可與哺乳動物細胞表面的受體特異性結(jié)合,通過受體介導的胞吞作用進入到細胞內(nèi),此類抗體或抗體片段被稱為內(nèi)化抗體。內(nèi)化抗體往往作為一種定向運載藥物、毒素、酶或者DNA的載體,取得廣泛的應用。
艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供基于絲狀噬菌體和T7λ噬菌體,構(gòu)建噬菌體展示抗體庫和肽庫,進行內(nèi)化抗體的高通量篩選服務:
★ 技術(shù)流程:
1. 構(gòu)建抗某種膜蛋白受體的次級抗體庫;
2. 將新鮮制備的、約1011噬菌體抗體與陰性細胞(膜蛋白受體-)相混合并孵育一定時間,以去除抗體庫中能夠與膜蛋白受體相結(jié)合的非特異性抗體;
3. 孵育混合物的上清再與陽性細胞(膜蛋白受體+)共同孵育,用*培養(yǎng)液多次洗滌細胞;
4. 將細胞重懸于適量的培養(yǎng)液中,置于細胞培養(yǎng)箱,適宜溫度下孵育一段時間,讓結(jié)合于細胞表面的噬菌體抗體內(nèi)化;
5. 用緩沖液洗滌細胞,去除未內(nèi)化但仍結(jié)合于細胞上的噬菌體抗體
6. 凍融并超聲破碎細胞,胰酶消化被內(nèi)化的噬菌體,感染大腸桿菌,進行下一輪的擴增和篩選。
艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供多種受體的內(nèi)化抗體的篩選服務:EGFR,CTLA4,HER2,CD20,CD3,CD59,CD33等
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