軟瓊脂法實(shí)驗(yàn) 返回列表頁

軟瓊脂法實(shí)驗(yàn)是一種測(cè)定細(xì)胞轉(zhuǎn)化及致瘤性的實(shí)驗(yàn)方法。該實(shí)驗(yàn)需要細(xì)胞錨定非依賴性生長狀態(tài)（腫瘤細(xì)胞生長特性）。相比于2D單層培養(yǎng)，該3D培養(yǎng)法的生長條件可以更準(zhǔn)確地反映出癌細(xì)胞的自然生長環(huán)境，因此動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行之前的軟瓊脂法實(shí)驗(yàn)是至關(guān)重要的。 實(shí)驗(yàn)前，將細(xì)胞（用致癌物質(zhì)或致癌物抑制劑處理的）于軟瓊脂培養(yǎng)21-28天。而后，克隆子可經(jīng)細(xì)胞染色法進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析并且計(jì)數(shù)。 

實(shí)驗(yàn)流程： 

1. 基層瓊脂 

2. 在基層瓊脂上加入細(xì)胞瓊脂，培養(yǎng)6-8天

3. 形成克隆子 

4. 溶解瓊脂（形成均質(zhì)細(xì)胞懸液） 

5. 細(xì)胞溶解并檢測(cè)

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