桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。

產(chǎn)品名稱	桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
英文名稱	Bartonella bacilliformis
貨號	CP933945

產(chǎn)品特征:

桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：

維生素K3標準品人γ氨基酸(GABA)ELISA Kit，48T/96T

鯡魚油標準品小鼠γ氨基酸(GABA)ELISA Kit，48T/96T

薄荷醇標準品大鼠γ氨基酸(GABA)ELISA Kit，48T/96T

鄰氨基苯酸酯標準品人兒茶酚胺(CA)ELISA Kit，48T/96T

化哌佐酯標準品小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA Kit，48T/96T

美芬妥因標準品大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA Kit，48T/96T

苯比妥標準品兔兒茶酚胺(CA)ELISA Kit，48T/96T

鹽酸哌卡因標準品人抗酒石酸酸性酸酶5b(TRACP-5b)ELISA Kit，48T/96T

潑尼松標準品小鼠抗酒石酸酸性酸酶5b(TRACP-5b)ELISA Kit，48T/96T

氨酯標準品大鼠抗酒石酸酸性酸酶5b(TRACP-5b)ELISA Kit，48T/96T

鹽酸美普卡因標準品人淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA Kit，48T/96T

 

3-巰基-2-酸1.2-二苯胺鹽標準品

桿狀巴爾通體探針法熒光定量PCR檢測試劑盒小鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA Kit，48T/96T

巰基嘌呤標準品大鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA Kit，48T/96T

美羅培南標準品兔淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA Kit，48T/96T

美沙拉嗪標準品人前列腺素E1(PGE1)ELISA Kit，48T/96T Dog IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗犬IgM抗體環(huán)己烷

Dog IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗犬IgM抗體霉素

Dog IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗犬IgM抗體土霉素

Dog IgM  兔抗犬IgM抗體四環(huán)素

DOCK1  細胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體紅霉素

DNPK1  DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體鏈霉素

Dnmt3a  DNA基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體新霉素

Dnmt3 Beta  DNA基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體多粘菌素B

Dnmt1  DNA基轉(zhuǎn)移酶1抗體卡那霉素

DNMBP  動力結(jié)合蛋白DNMBP抗體桿菌肽

DNM1L  發(fā)動蛋白樣相關(guān)蛋白1抗體慶大霉素

DNase II  脫氧核糖核酸酶2抗體粘菌素

DNase I  脫氧核糖核酸酶1抗體利福霉素SV

DNase gamma  脫氧核糖核酸酶γ抗體阿米卡星

DNAPK/PRKDC  DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體麥迪霉素