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50T-刺激隱核蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
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  • 50T-刺激隱核蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 進口、國產(chǎn)
更新時間: 2024-08-22 21:00:07
期: 2024年8月22日--2025年2月22日
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產(chǎn)品簡介

刺激隱核蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。

詳細介紹

產(chǎn)品名稱

刺激隱核蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

英文名稱

Cryptocaryon irritans

貨號

CP934116

產(chǎn)品特征:

刺激隱核蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強:采用熱啟動酶的激活機制,抑制非特異性擴增 。
重復性好:擴增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴增效率高:擴增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是
刺激隱核蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:

2,7-二苯烯基萘(順反異構(gòu)體混合物)纖維蛋白原凝結(jié)時間(FIB)Clauss法檢測試盒

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5-氟-2-硝基苯腈組織樣品組織型纖維蛋白溶酶原激活(tPA)活性化學發(fā)光法定量檢測試盒大豆苷元;大豆甙元;黃豆苷元;大豆素Daidzein486-66-820mgHPLC≥98%

大花雙參苷ATriplostoside A20mgHPLC≥98%

大黃酚;大黃根酸;8-二羥基-3-基蒽醌Chrysophanol481-74-320mgHPLC≥98%

大黃酚-8-O-β-D-葡萄糖苷;大黃酚-8-O-葡萄糖苷Chrysophal 8-O-glucoside13241-28-620mgHPLC≥98%

大黃素;朱砂蓮素Emodin518-82-120mgHPLC≥98%

大黃素-1-O-葡萄糖苷Emodin-1-O-glucoside38840-23-220mgHPLC≥98%

大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷;大黃素-8-O-葡萄糖苷Emodin-8-glucoside23313-21-520mgHPLC≥98%

大黃素醚;1,8-二羥基-3-氧基-6-基蒽醌Physcion521-61-920mgHPLC≥98%

大黃素醚-8-O-β-D-葡萄糖苷;大黃素醚-8-O-葡萄糖苷Physcion-8-O-β-D-glucopyranoside26296-54-820mgHPLC≥98%

大黃酸;大黃苷,1,8-二羥基-3-羧基蒽醌Rhein478-43-320mgHPLC≥98%

需要自備的器材:

1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研

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