詳細介紹
人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白英文名稱:Human cytovillin/ezrin ELISA Kit產(chǎn)品別名:人cytovillin/ezrin elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human cytovillin/ezrin ELISA Kit |
貨號 | CS-E3885 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正常現(xiàn)象,微加熱至40℃使結晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外)。
5. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
DNA產(chǎn)物去鐵純化試盒Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原)
果菜類食物DNA分離試盒ALK (Anaplastic Lymphoma Kinase)(CD246Ag) 間變型淋巴瘤激酶(抗原)
稻麥類食物DNA分離試盒5-HT(5-Hydroxy-L-tryptophan/L-5-HTP) 5-羥色胺
乳品類食物DNA分離試盒AM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質素(多肽抗原)
食物DNA高質純化試盒5-HTR1A (5-HT1A (5-hydroxytryptamine/serotonin receptor 1A; 5HT1a; ADRBRL1; ADRB2RL1; HTR1A) 5-羥色胺受體1A(多肽)
油脂DNA萃取試盒TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)
動物毛發(fā)DNA萃取試盒TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3) 金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)
動物牙齒DNA萃取試盒ADM R, Adrenomedullin receptor 腎上腺髓質素受體(抗原)
人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白ELISA試劑盒動物指(趾)DNA萃取試盒VTG(vitellogenin) 青鳉魚卵黃蛋白
動物骨DNA萃取試盒Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(CT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)
樹脂法血跡DNA萃取試盒Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)
樹脂法毛發(fā)DNA萃取試盒AR (Androgen Receptor)peptide 雄激素受體(多肽抗原)
樹脂法唾液DNA萃取試盒5-HTR2A 5-羥色胺受體2A抗原
樹脂法骨DNA萃取試盒5-HTR3(5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 3a) 5-羥色胺受體3抗原
樹脂法精液DNA萃取試盒5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原AMCA conjugated Affinipure Donkey Anti-Goat IgG (H+L)
AMCA conjugated Affinipure Donkey Anti-Goat IgG (H+L)Cenexin1英文名稱:ASC人型肝炎病X原(HBxAg)免疫試盒
ZNF693英文名稱:TSKSFK506結合蛋白相關蛋白體(他克莫司相關蛋白)
RRAD (Ras-related associated with diabetes )英文名稱:BRCA1白細胞介素-10受體β抗體
C5orf19 英文名稱:Afadin人型肝炎病X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)免疫試盒 英文名稱標準品大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit,48T/96T 1g
ZBTB3英文名稱:TPX2成纖維細胞生長因子受體1原癌因伴侶蛋白體
SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1)英文名稱:PSD-95 白細胞介素-12受體β1抗體
英文名稱標準品兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit,48T/96T 200mg
ZWILCH英文名稱:TRIB3鈣粘蛋白家族成員7體
shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1)英文名稱:BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2)白細胞介素-12受體β2抗體 C20ORF141英文名稱:C1orf65人肺炎衣原體抗體IgA(Cpn-IgA)免疫試盒
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。