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技術(shù)文章

熒光PCR凍干-吐溫

閱讀:1970          發(fā)布時間:2020-7-25

吐溫溶于水,容易分散。按結(jié)構(gòu)式中R不同,分為吐溫20、 吐溫40、吐溫80和吐溫85等種類。由司班分子中 殘余的羥基與氧化乙烯縮合而成。主要用作乳化劑,色層分析固定液。吐溫的應用例如吐溫80在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中易溶,在礦物油中極微溶解。應用于注射液及口服液的增溶劑或乳化劑;膠囊劑用分散劑;軟膏劑用乳化劑和基質(zhì),栓劑用基質(zhì)等。例如吐溫20在實時熒光PCR反應緩沖液的應用,反應緩沖液包括這些原料如三羥甲基氨基甲烷?鹽酸緩沖液、氯化鎂、硫酸銨、二甲基亞砜、脫氧核糖核苷三磷酸、甘油、牛血清蛋白、吐溫20、三氮化鈉、Rox參比染料、去離子水等。該緩沖液提高了PCR反應效率,適用于PCR技術(shù)的高效擴增型和靈敏檢測,具有穩(wěn)定性好,熒光效果佳、靈敏度高的優(yōu)點。熒光PCR輔料篩選要點:1.不影響擴增和反應。2.選擇合適的保護劑聯(lián)用方式。3.注意保護劑密度范圍。

 

 

 

Pilot3-6T應用示例(熒光PCR凍干):

  1. 探針、底物、引物原料要求確定。
  2. 凍干溶液配方開發(fā),采用正交法或響應曲面法進行輔料篩選。
  3. 選擇適合的包材和模具。
  4. 設計凍干曲線配合輔料篩選。
  5. 確定配方及工藝。
  6. 穩(wěn)定性測試。
  7. 根據(jù)穩(wěn)定性測試結(jié)果修正工藝或配方。
  8. 整個環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設備、人員的結(jié)合。

 

 

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