詳細介紹
DMEM高糖培養(yǎng)液(1.5G/L碳酸氫鈉)
經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用廣泛的培養(yǎng)基。其他 如 M199 、 IMDM 、 L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。其具體的特征及應用如下:
DMEM高糖培養(yǎng)液(1.5G/L碳酸氫鈉)
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基,起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
低糖適于依賴性貼壁細胞培養(yǎng),特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細胞培養(yǎng),也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng),也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞的培養(yǎng)。例如CHO細胞表達生產(chǎn)乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。
DMEM高糖培養(yǎng)液(1.5G/L碳酸氫鈉)
至于選擇何種培養(yǎng)基并沒有一定的標準,有幾點建議可供參考:
(1)建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應該是培養(yǎng)這種細胞的培養(yǎng)基??梢圆殚唴⒖嘉墨I,或在購買細胞株時咨詢。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索,如Invitrogen網(wǎng)站上有一個Cell Line Database的工具,選擇你感興趣的細胞類型,它就會彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,很方便。
(2) 其它實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。
(3) 根據(jù)細胞株的特點