詳細介紹
HEPES液(1M)
Hepes緩沖液的主要成分是(2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid),HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力。其優(yōu)點是在開放式培養(yǎng)或細胞觀察時能維持較恒定的PH值.在這種培養(yǎng)條件下,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。
大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色.HEPES有些昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒. 原則上,hepes緩沖液可用來代替碳酸氫鹽,以解除需要高濃度CO2培養(yǎng)環(huán)境的限制.實際操作中并非如此簡單。溶解的CO2與碳酸氫鹽對良好的細胞生長也是很重要的。
HEPES液(1M)
含238.3g/L HEPES。2-8℃保存
至于選擇何種培養(yǎng)基并沒有一定的標準,有幾點建議可供參考:
(1)建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細胞的培養(yǎng)基??梢圆殚唴⒖嘉墨I,或在購買細胞株時咨詢。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索,如Invitrogen網(wǎng)站上有一個Cell Line Database的工具,選擇你感興趣的細胞類型,它就會彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟,很方便。
(2) 其它實驗室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。
(3) 根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選RPMI1640 。
(4) 用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞,觀察其生長狀態(tài),可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據(jù)實驗結(jié)果選擇培養(yǎng)基,這是客觀的方法,但比較繁瑣。