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詳細介紹
DH10B T1 化轉克隆感受態(tài)
產品簡介
大腸桿菌 DH10B T1 中的 tonA 突變賦予了該菌對噬菌體 T1 和 T5 的抗性，可以保護寶貴的文庫免
受污染。此外，甲基化依賴的限制系統(tǒng)(mcrA、mcrBC 和 mrr)的突變使 DH10B T1 成為構建原核和
真核基因組文庫的理想選擇。該菌株還具有 ΔlacZM15 基因型，因此可以在含有 X-Gal 的平板上進
行藍/白篩選。該菌株的化學感受態(tài)效率不高，常使用電轉化感受態(tài)；經 pUC18 質粒轉化檢測，
DH10B T1 化學感受態(tài)細胞的轉化效率達 107 cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分 CC96108-01 CC96108-02 CC96108-03
DH10B T1
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ-
rpsL nupG tonA
DH10B T1 化轉克隆感受態(tài)存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
DH10B T1 化轉克隆感受態(tài)注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保.高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
產品簡介
大腸桿菌 DH10B T1 中的 tonA 突變賦予了該菌對噬菌體 T1 和 T5 的抗性，可以保護寶貴的文庫免
受污染。此外，甲基化依賴的限制系統(tǒng)(mcrA、mcrBC 和 mrr)的突變使 DH10B T1 成為構建原核和
真核基因組文庫的理想選擇。該菌株還具有 ΔlacZM15 基因型，因此可以在含有 X-Gal 的平板上進
行藍/白篩選。該菌株的化學感受態(tài)效率不高，常使用電轉化感受態(tài)；經 pUC18 質粒轉化檢測，
DH10B T1 化學感受態(tài)細胞的轉化效率達 107 cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分 CC96108-01 CC96108-02 CC96108-03
DH10B T1
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ-
rpsL nupG tonA
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保.高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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