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DH10Bac 化轉克隆感受態(tài)

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更新時間:2023-04-26 16:26:40瀏覽次數:599

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產品簡介

供貨周期 現貨 應用領域 生物產業(yè)
DH10Bac 化轉克隆感受態(tài)產品簡介
DH10Bac 菌株主要用于生產重組桿狀病毒分子(Bac-to-Bac 桿狀病毒表達系統)。該菌株中含有父
本 bacmid bMON14272 和輔助質粒 pMON7124;其中, bMON14272 中包含 mini-F 復制子, 卡那抗
性基因, attTn7 位點和 lacZα 互補因子

詳細介紹

產品簡介

DH10Bac  化轉克隆感受態(tài)

DH10Bac 菌株主要用于生產重組桿狀病毒分子(Bac-to-Bac 桿狀病毒表達系統)。該菌株中含有父

bacmid bMON14272 和輔助質粒 pMON7124;其中, bMON14272 中包含 mini-F 復制子, 卡那抗

性基因, attTn7 位點和 lacZα 互補因子;而輔助質粒 pMON7124 含有 tnsABCD 區(qū),可表達轉座蛋白

來幫助把供體質粒上的 mini-Tn7 插入到父本的 bacmid 上的靶標位點。當 DH10Bac 感受態(tài)細胞轉化

了在多克隆位點克隆了外源片段的供體質粒(pFastBac)時,該菌株可生成復合 bacmid。DH10Bac

菌株攜帶 ?80lacZΔM15 突變,因此可用于藍白斑篩選實驗。經 pUC18 質粒轉化檢測,DH10Bac

受態(tài)細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。

DH10Bac  化轉克隆感受態(tài)

產品組成

組分 CC96136-01 CC96136-02 CC96136-03

DH10Bac

化學感受態(tài)細胞

10 × 100 μL

100 × 100 μL

定制

基因型:F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL

nupG /pMON14272 / pMON7124

存儲條件

-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

質量控制

無外源質粒 DNA 殘留

化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA

DH10Bac  化轉克隆感受態(tài)

使用方法

1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;

2. 將待轉化DNA加入到100 μL感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30 min;

3. 將離心管置于42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激90s后,立刻置于冰浴中靜置2-3 min;

4. 向離心管中加入900 μL LBSOC培養(yǎng)基(室溫或37 ℃預熱),后置于37 ℃搖床復壯45 min;

5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

注意事項

1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;

2. 加入的待轉化DNA的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的1/10

3. 加入待轉化DNA后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;

4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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