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詳細(xì)介紹
| 名稱 | PA317 (小鼠成纖維細(xì)胞) |
| 別稱 | pA317 |
| 種屬 | 小鼠 |
| 年齡（性別） | 胚胎 |
| 組織來源 | 胚胎 |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
| 背景描述 | PA317細(xì)胞源自TK-NIH/3T3細(xì)胞，通過pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細(xì)胞，結(jié)果生成可以感染許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細(xì)胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴祟?，可能因?yàn)橛糜跇?gòu)建PA317細(xì)胞而轉(zhuǎn)入的DNA丟失，能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細(xì)胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細(xì)胞。選擇后，PA317細(xì)胞應(yīng)在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤，此后PA317細(xì)胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個(gè)月。 |
| 生物安全等級(jí) | 1 |
| 生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | DMEM(PM150210)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120) |
| 推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
| 推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
| 凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃ |
| 保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; CRL-9078 ECACC; 89032007 |
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