HMC-1 人肥大細(xì)胞

細(xì)胞背景：
來源于一名 52 歲男性肥大細(xì)胞白血病患者的外周血樣本。該細(xì)胞有多重亞型分別為：HMC- 1 5C6 ，HMC-1.1  ，HMC-1.2   。廣泛用于人肥大細(xì)胞功能研究，因?yàn)樗鼈儽憩F(xiàn)出組織肥大細(xì)胞的許多關(guān)鍵特征，例如組胺、類ydbm、肝素和類似細(xì)胞表面抗原譜的表達(dá) （1,2） 。受體las激酶 KIT 在肥大細(xì)胞上表達(dá)，在肥大細(xì)胞的增殖、 功能和存活中起重要作用。KIT 中的激活突變與肥大細(xì)胞生長(zhǎng)失調(diào)有關(guān)，并與肥大細(xì)胞腫瘤和系統(tǒng)性肥大細(xì)胞增 多癥有關(guān)。據(jù)報(bào)道，HMC- 1  細(xì)胞系中存在兩個(gè) KIT  激活點(diǎn)突變 。這兩種突變都將受體轉(zhuǎn)化為組成型las磷酸 化和活性狀態(tài)，導(dǎo)致生長(zhǎng)因子非依賴性增殖。HMC-1.1 （HMC- 1（560）） 和 HMC-1.2  （HMC- 1（560,816）） 是 HMC- 1  細(xì)胞系的兩個(gè)變異亞系。HMC-1. 1 具有 V560G 突變，但不具有 D816V 突變。HMC-1.2   同時(shí)具有 V560G  和D816V  突變，并且表現(xiàn)出比 HMC-1. 1  更高的增殖率。有人認(rèn)為，HMC-1.2 的較高增殖潛力可能歸因于 D816V 突變。

細(xì)胞特性：
形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣,懸浮生長(zhǎng)。用途：僅供科研使用

培養(yǎng)條件：
1） 準(zhǔn)備 IMDM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 空氣，95%；二氧化碳，5% 。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%
懸浮細(xì)胞參考：

大多數(shù)懸浮細(xì)胞對(duì)于環(huán)境比較敏感，建議一直維持高密度生長(zhǎng)，一般情況下細(xì)胞密度維持在 1×10 5 到 1×10 6 個(gè)/mL（不同細(xì)胞對(duì)密度要求不同） 。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中 800-1000rpm，離心 5min，棄去 上清，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按 1：2 的比例（可以 1:1 分瓶）分到新 T25 瓶中，添加 5-6ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按 1:2 和以上比例 進(jìn)行。大多數(shù)血液類相關(guān)的懸浮細(xì)胞受運(yùn)輸影響比較大，會(huì)出現(xiàn)一批死細(xì)胞，如果因此密度降低了，可以離心后 轉(zhuǎn)移至 T25 瓶中豎著培養(yǎng)，培養(yǎng)基添加 5ml 以提高總體密度，隔一天后觀察密度可以的話再補(bǔ)液 3ml 培養(yǎng)

基后 T25 瓶放倒，等沉淀穩(wěn)定后觀察細(xì)胞密度，持續(xù)添加培養(yǎng)基等密度上升足夠傳代為止