詳細介紹
moc1/moc2 小鼠口腔鱗狀細胞癌 /雌性
品系: C57BL/6 Cxcr3-/
細胞來源:國外
細胞背景:口腔鱗狀細胞癌(OSCC)是頭頸癌的一個突出子集,頭頸癌是第六大常見癌癥。發(fā)生 OSCC 的主要危險因素是致癌物暴露,將頭頸癌的這一亞群與人瘤病毒誘導的頭頸癌區(qū)分開來。盡管在 檢測、手術、hl和放療方面取得了進展,但 OSCC 的預后幾十年來一直保持穩(wěn)定。此外,在 診斷時,大約三分之二的 OSCC 患者患有局部晚期疾病,導致發(fā)病率和死亡率增加。
D=4418
細胞特性:形態(tài):淋巴母多角形細胞樣,貼壁+懸浮生長。用途:僅供科研使用
培養(yǎng)條件 :
1)500ML 培養(yǎng)基:IMDM:F10/F12=2:1(313ml:157ml)培養(yǎng)基+FBS 10%(50ml)+2.5mg/500ml 胰島素+20ug/500ml +2.5ug/500ml EGF+ P/S 1% 雙抗1%
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%
注意事項:MOC1 細胞活性特別高,增值速度非???,不建議傳代密度太大,而選擇稀一點重鋪,等長滿 80%左右傳代的時候,很難消化下來,建議加入 0.25%EDTA 的ym進去后充分混勻所有細胞都接觸到y(tǒng)m,放置到培養(yǎng)箱進行消化,時長大約是 3-4 分鐘左右后拿出來,在培養(yǎng)器皿的側邊進行拍打幫助細胞脫落,拍打過程大約持續(xù) 2 分鐘左右才會脫大部分細胞,如果脫落比例還不是很多,也可以重新放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化 1-2 分鐘后再次拿出來進行拍打脫落,等 80-90%細胞都脫落后再終止消化,離心重懸再重新鋪瓶,分散均勻。
MOC2 細胞貼壁性和常規(guī)細胞類似沒有特別牢固。倍增周期也沒有 MOC1 快。采用常規(guī)消化方法處理。
貼壁細胞參考:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加入 0.25%(w / v)ydbm-0.53 mM EDTA 于培養(yǎng)瓶中(T25 瓶 1-2mL,T75 瓶 2-3mL),置 于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察 細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入 3-4ml 含10%FBS 的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 3-5min,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按 1:2 的比例分到新 T25 瓶/6cm 培養(yǎng)皿中,添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2~1:5 的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前 3 代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
4)運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。
懸浮細胞參考:
懸浮狀態(tài)下生長的細胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),一般情況下細胞密度維持在 1×105~1×106 個/mL(不同細胞對密度要求不同,)可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中 1000rpm,離心 5min,棄去上清,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按 1:2 的比例分到新 T25 瓶中,添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2~1:4 的比例進行