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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌，它能夠
感染 大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。Ar.A4 發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有農(nóng)桿堿型
Ri 質(zhì)粒，具有廣泛的宿主范圍（玉米，煙草，胡蘿卜，甘草等），同時(shí)具有卡那m素抗性。本公
司生產(chǎn)的 Ar.A4 化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pK7WGF2 質(zhì)粒（壯觀m素抗性）檢測(cè)，轉(zhuǎn)
化效率>104 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Ar.A4
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型：Agrobacterium rhizogenes(kanR ) Ar A4 Ri(agropine type)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存; 請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，用手撥d管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘、37℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；
3.加入 900 μl 無(wú)抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí)；
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. Ar.A4 具有卡那m素抗性，不可用于具有卡那m素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。
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