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詳細介紹
產(chǎn)品簡介
本品為使用大腸桿菌 BL21(DE3)菌株制備的高效化學(xué)感受態(tài)細胞，轉(zhuǎn)化效率超過 107 cfu/μg DNA，
可以用于 pET 等系列質(zhì)粒的蛋白高效表達。
產(chǎn)品組成
組分
BL21(DE3)感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產(chǎn)品特性
-BL21(DE3)品系，T7 RNA 聚合酶位于 λ 噬菌體 DE3 區(qū)，該區(qū)域被整合于 BL21 的染色體上；
-是以 T7 RNA 聚合酶為表達系統(tǒng)的高效蛋白表達宿主，適合于非病毒蛋白重組表達。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90 s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入900 μL LB或SOC培養(yǎng)基（室溫或37 ℃預(yù)熱），然后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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