詳細介紹
產品簡介
JM101 菌株來源于 E. coli K-12 菌株,是常見的 pUC 系列質粒表達菌株。經 pUC18 質粒轉化檢測,
JM101 感受態(tài)細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
JM101
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F’ traD36 proAB lacIq lacZΔM15/Δ(lac-proAB) glnV thi
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。