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HCT15/FU人結(jié)直腸腺癌細(xì)

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更新時(shí)間:2025-02-11 14:18:02瀏覽次數(shù):11次

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細(xì)胞系特征

編號(hào):MXC862

細(xì)胞株名稱:HCT15/FU 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞耐藥株

種屬:人

組織來源:直腸腺癌

生長特性:貼壁生長

形態(tài)特征:上皮細(xì)胞

微生物及支原體檢測:陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件:

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+10ug/ml FU

血清我們推薦用:

GIBCOFBS-10099-141HYCLONEFBS-SH30084.03

培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法:

收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。

(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

()如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細(xì)胞脫落后,加入2ml 以上培養(yǎng)基中止消化。

3. 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(45X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?/strong>10X20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們聯(lián)系。..

凍存方法:

凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO

儲(chǔ)存:液氮儲(chǔ)存

mitochondrial content in peripheral T cells, which results in increased ROS production [78, 80]. Owing to autophagy-related perturbations in turnover of mitochondria and pro-

apoptotic factors, these data support that decreased survival, at least in part, may explain decreased CD4+ and CD8+ T cell numbers in autophagy-deficient models. In addition todefects in survival, reduced CD4+ and CD8+ T cell number may also be explained by defects in proliferation in autophagy-deficient cells. The cyclin-dependent kinase inhibitor

53. Rolf J, Zarrouk M, Finlay DK, ForetzM, Viollet B, Cantrell DA. AMPKalpha1: a glucose sensor that controls CD8 T-cell memory. Eur J Immunol. 2013; 43:889–896. [PubMed: 23310952]

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