細胞系特征

細胞株名稱：K562/Taxol 人白血病耐藥株

種屬：智人,女性

組織來源：骨髓；慢性骨髓性白血病(CML)

生長特性：懸浮生長

形態(tài)特征：淋巴母細胞

微生物及支原體檢測：陰性

細胞背景：K-562由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。 細胞被歸入高度未分化的粒性白細胞類。 Anderson等對其表面膜性質(zhì)的研究表明，K-562是一株人類紅白血病細胞。 K-562細胞株在自然殺傷分析中廣泛作為高敏感的體外受體。 See Pross等將它用于NK細胞的體外詳細檢測，包括NK細胞活性的數(shù)學(xué)量化。 K-562母細胞是多能性，造血惡性細胞，它能自發(fā)分化成可識別的紅血球祖細胞、粒性白細胞、單核細胞等。它是EBNA陰性的。

安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1%P/S+200ng/ml

血清我們推薦用:

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法：

收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，低速離心，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液（注意不要吸出細胞），換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 低速離心，棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中（補加培養(yǎng)基至8到10ml）。如果沒有特別說明，收到細胞后的次傳代一般是一傳二。

注：1、觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯(lián)系。

凍存方法：

凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO

儲存：液氮儲存